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标题: 培养间充质干细胞培养基问题 [打印本页]

作者: simed    时间: 2015-8-13 09:49     标题: 培养间充质干细胞培养基问题

培养间充质一般用什么培养基较好?节省成本,需要加什么因子吗
作者: tingting2113    时间: 2015-8-13 10:03

之前养过胎盘间充质干细胞,没加什么特别的因子,就10%胎牛血清的DMEM。
作者: limeiying    时间: 2015-8-13 10:25

可以加bFGF,可促进MSCs增殖,维持MSCs未分化状态。
作者: nkcell    时间: 2015-8-14 13:03

要是形态好的话用GIBCO的很不错,要是节约成本国内灌装的就可以,要加血清,血清要先做实验,同一个厂家的不同批号血清都是可能不同的
作者: yahooyeah    时间: 2015-8-14 16:18

回复 simed 的帖子4 |3 E/ m! P- X! x3 z% ?9 A) z0 g
( L, S' }$ K* i1 x1 N
a-MEM
作者: Morpheus    时间: 2015-8-21 10:06

个人觉得GIBCO的a-MEM比较好,培养过程中加了bFGF,可以维持干细胞特性,但是bFGF价格稍贵一些。
作者: Morpheus    时间: 2015-8-21 10:06

个人觉得GIBCO的a-MEM比较好,培养过程中加了bFGF,可以维持干细胞特性,但是bFGF价格稍贵一些。
作者: Morpheus    时间: 2015-8-21 10:06

个人觉得GIBCO的a-MEM比较好,培养过程中加了bFGF,可以维持干细胞特性,但是bFGF价格稍贵一些。
作者: wuhuaguo88l    时间: 2015-8-28 08:16

a-MEM与GIBCO FBS效果还是很好的,细胞因子如pdgf,vegf,egf等等,可根据情况加哪些因子。
作者: chenguangyu    时间: 2015-8-28 10:04

买一瓶专用的间充质干细胞培养基就OK了    花不了几个钱
作者: woshibotao_01    时间: 2015-8-28 21:03

低糖DMEM+10%的血清,额外可以加bFGF
作者: wuhuaguo88l    时间: 2015-9-8 07:49

a-MEM和GIBCO胎牛血清即可,细胞因子主要是VEGF、EGF、FGF、PDEG等,并一定都要加,可根据实验要求和目的不同,添加不同因子。
作者: pcljsw2008    时间: 2015-9-16 10:13

回复 wuhuaguo88l 的帖子  Y3 P, I7 P; k. V8 {1 M9 u

3 t* b' y+ L( q, L! N( l请教下这几样因子的浓度可有相关参考,谢谢,我想自己配培养基用,但一直效果不理想
作者: edwardellen    时间: 2015-9-18 15:39

我们用的是DMEM/F12 混合培养基,都是商业化的,血清加进口的胎牛,基本都没有问题。
' Q( s( u6 C# u! M& t0 |如果是无血清培养,可以用BI的,但是成本比较高,500mL接近4000元,LONZA的UltraCULTURE也不错,好像还有证,可以医用的。1 u4 Q0 l; h  \5 T
一般都不用加什么细胞因子,因为间充质相对来说还是很好养的,有钱不怕费事的话,可以加一点bFGF,形态会比较好看。
* ?1 |. B+ \5 B/ j重要的是传代消化的时候,一定要注意消化酶的使用,不要刺激的太久,对细胞损伤大。
作者: caustic    时间: 2015-9-30 11:34

如果你一般实验的话 就用DEME/F12就可以了,如果是其他使用的 建议用GIbco的临床培养基。
作者: playboy723    时间: 2015-10-8 10:59

回复 edwardellen 的帖子
7 h# l& |9 b) O: r
! Q# s* _% y$ ^+ g请问下你用无血清培养基的时候MSC是悬浮生长还是贴壁生长的?我之前用DMEM/F12+knock out血清结果MSC不贴壁,我硬是悬浮培养了好多代,后来换成FBS后细胞才又贴壁生长。呵呵,挺逗的。
作者: edwardellen    时间: 2015-10-8 12:24

回复 playboy723 的帖子" r1 f5 c0 s- h6 |
6 C, G, c& H1 r  H- H
贴壁的,我试过BI和stemcell的,胶原酶消化的原代不行,很难贴壁,但是组织贴壁或者传代以后的,都没啥问题。你这个悬浮生长的挺有意思的呀,没有见过,是脐带间充质么?
作者: 20062926    时间: 2015-10-9 15:18

如果用于实验  就是F12加胎牛或小牛血清,再加点谷氨酰胺吧,如果是用于治疗就用GIBCO的DMEM吧,因子用血清替代品
作者: playboy723    时间: 2015-10-11 05:33

回复 edwardellen 的帖子$ h, T  x1 K" ~+ i

- k2 L( `9 e% W* K恩,是脐带间充质,我的确是用胶原酶消化的,从这一点上可以看出knock out血清还是不如FBS,但我没用过你说的那两种培养基,你个人感觉他们和FBS相比效果如何?
作者: edwardellen    时间: 2015-10-11 21:26

回复 playboy723 的帖子. Y0 W/ _" e( g( [3 g3 c- b
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细胞不如血清培养基长得旺盛,但是传几代也不至于有什么大问题,做实验是可以的。
作者: ywx6302706008    时间: 2015-10-24 17:50

用dmem和10%fbs就好了,一般不需要加什么因子




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