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标题: 这是我养的脐血间充质干细胞，大神帮我看看 [打印本页]

作者: ych123 时间: 2015-8-17 21:30 标题: 这是我养的脐血间充质干细胞，大神帮我看看

最近在养脐血间充质干细胞，里面总是很多杂细胞（圆形的），有一瓶最初看起来杂细胞很少，可是养着养着杂细胞越来越多

作者: qiqishichaoren 时间: 2015-8-18 09:01

脐带血间充干培养出来是有几率的，你这里的细胞量挺可观的。考虑传代会取出大部分圆形细胞4 g. V' C( W0 y

作者: ych123 时间: 2015-8-18 09:08

回复 qiqishichaoren 的帖子% a& n0 {% J5 N; }+ ]! P6 [
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就是啊，大部分是圆形的，都说传代通过控制消化时间可以纯化，不知道消化到什么状态就可以终止了

作者: 121qwq 时间: 2015-8-18 10:22

有人说这个是破骨细胞

作者: shan 时间: 2015-8-18 10:27

一般我们做间充质干细胞的消化是这样操作的：如果是T75的瓶子，一瓶加2ml 0.125%胰酶（含EDTA），消化1-2min之后，立马终止消化，离心。我们做原代的时候，里面也经常会有其他杂细胞，一般这样消化操作传一代之后细胞就会很纯了。谢谢，仅供参考。

作者: wf78365421 时间: 2015-8-18 10:53

继续培养。

作者: ych123 时间: 2015-8-18 10:53

回复 121qwq 的帖子+ p; Q: o& M7 ~2 R
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我感觉也挺像破骨的，只有少量的梭形细胞

作者: ych123 时间: 2015-8-18 10:54

回复 shan 的帖子6 ]+ v2 d# C/ F. p6 w4 ]

好的，谢谢，，，，

作者: ych123 时间: 2015-8-18 10:55

回复 wf78365421 的帖子

是继续养传代吗？我明天打算在提一次细胞

作者: 121qwq 时间: 2015-8-18 11:19

回复 shan 的帖子; z0 f$ L1 S# d# g. y1 ]
1 }( U' \+ d. p* k0 {
跟这位同行差不多，做法可行

作者: 121qwq 时间: 2015-8-18 11:20

回复 ych123 的帖子 e9 f* |1 H: G2 p1 l) ]9 u0 N' a2 C
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等梭形的细胞增殖差不多了就消化下来传代即可

作者: 浪花 时间: 2015-8-18 12:19

你好，我想做脐带血间充质干细胞的分离与纯化，您可以帮我一下吗？步骤是啥啊，我看文献看来好久，也理不出个头绪

作者: 浪花 时间: 2015-8-18 12:19

nihao

作者: yongchens0 时间: 2015-8-18 12:45

MSC需要通过传代贴壁培养，消化时间等进行纯化。可以参照国际细胞治疗协会（ISCT）对MSC的界定

作者: ych123 时间: 2015-8-18 12:50

回复 yongchens0 的帖子7 t# Y7 m2 c2 F1 q* I
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恩，好的，我在摸索摸索

作者: ych123 时间: 2015-8-20 17:52

回复 qiqishichaoren 的帖子/ @, k- y6 G/ D! B2 V" e+ D3 Y
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第一批提的细胞策底宣告失败了，前天传代消化过久了，那天加胰酶后半天细胞没见漂起来，形态也还是梭形，等了很长时间，后面消化过了，现在去看都没几个细胞了

作者: qiqishichaoren 时间: 2015-8-24 12:17

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照理说不会这么严重吧，尤其是消化过程，原代消化有难度是有可能的，建议分两次消化，第一次消化收集细胞，第二次再消化，这样第一次消化下来的细胞就不会过头了。但是也不至于后期贴壁和生长这么差的，考虑有没有支原体污染或者其他污染。

作者: qiqishichaoren 时间: 2015-8-24 12:19

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还有就是你消化后种瓶后应该看一下细胞密度，是本来就少还是死掉了

作者: ych123 时间: 2015-8-24 12:25

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当时看了细胞密度的，细胞还是蛮多的，但是后来贴壁的很少，，不知道怎么回事

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