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新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？
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作者:
梦月寒
时间:
2015-8-21 14:48
标题:
新手求教，诱导分化21天，细胞都长满了，如何解决这个问题？
如题
作者:
wf78365421
时间:
2015-8-21 17:00
传代
作者:
梦月寒
时间:
2015-8-23 22:22
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wf78365421
的帖子
i6 F' }9 D% }
: G1 N0 C, I# Y6 F
加药的怎么传代
作者:
saier.HK
时间:
2015-8-24 08:39
血清浓度降低些，5%FBS jiuOK
2 O: j) F# P& ]2 y7 u
作者:
yinchong42
时间:
2015-8-25 00:30
什么的分化？成骨吗？一般来说诱导分化都是需要考虑细胞增殖的，很多时候需要控制实验开始时细胞的数量
2 ? }/ {( O2 c4 Q0 N
作者:
漂流瓶
时间:
2015-8-25 18:00
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yinchong42
的帖子
/ o5 i" u5 M% S- M% E$ v( ~
8 F, U9 L+ Q% K- \3 \8 Q
同意，这类试验在开始的时候就要考虑细胞接种密度吧。虽然这个说起来容易，其实操作起来不是很容易。我培养的是神经干细胞，如果接种密度太小，很容易分化或是凋亡，可是如果过大，增殖过快，最后成像效果又很不好，所以只能慢慢摸索了。
作者:
yinchong42
时间:
2015-8-25 22:56
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漂流瓶
的帖子
1 w. A- j+ j$ w5 @0 X2 ]) Z
2 X, g- s: {! P
我是做成骨诱导，但是我们的诱导培养基是具有抑制增殖功能的
作者:
漂流瓶
时间:
2015-8-27 20:52
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yinchong42
的帖子
5 p2 ?0 E) X& |/ O- k8 Q7 w: ]! I4 o' {
) j& w2 Y0 b; Q2 g: z
哦，所以你培养的成骨细胞应该是增殖很缓慢或者基本不增殖才对，是吗？这个我就不知道了。目前我在做的蛋白中，有一种小分子应该也是具有抑制作用的，抑制分化增殖和迁移（目前的假设），可是实际实验过程中，对于分化和增殖的影响却很多样性，并不是我们一开始推论的纯粹的抑制作用。这个机理比较复杂，里面包含很多影响因素，并且体外和体内环境也不完全一致，所以我目前也在摸索中。
作者:
梦月寒
时间:
2015-9-1 20:07
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yinchong42
的帖子
7 _" i0 D1 n+ t( g% Y9 V; `. W
- y5 _+ E1 D# {* B
我也做成骨诱导，请问你的抑制增殖用的什么，还有做CCK8测增殖不是矛盾了吗
作者:
yinchong42
时间:
2015-9-2 15:26
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漂流瓶
的帖子
4 V2 n& i! V3 z& _
& v( g- J! H0 Q+ f a T' |9 I
就是这个意思吧，以前我做肌肉分化的时候，可以说就是在血清饥饿的条件下培养，细胞在增殖受阻的情况下就会分化了，成骨诱导也可以说是差不多吧
作者:
yinchong42
时间:
2015-9-2 15:27
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梦月寒
的帖子
) F* F/ h4 o) e+ g, g2 r- g' x* u
. r; g) O( M4 m2 S& |# Q- i
不好意思有点误会了，我们就是正常的成骨诱导而已，只是诱导成骨的细胞增殖没有那么快而已
作者:
bleachmen2
时间:
2015-12-3 16:56
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yinchong42
的帖子
) D6 D6 I8 y8 S( I' {9 B
( ?; m/ Z( d, }7 ~
胰岛β细胞分化的做过吗？不知道现在有没有成品试剂盒卖？
作者:
yinchong42
时间:
2015-12-3 21:00
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bleachmen2
的帖子
+ N' Q7 w4 }2 m7 ~4 a' w9 c
* G( {# _7 g) T2 E9 c
没做过，不好意思啊
作者:
luyue6453
时间:
2016-3-5 16:36
买成品的诱导试剂盒，在细胞不太密的情况的就开始诱导，及时后期长的很密只要不脱落你一样可以成功的。
作者:
studentyin
时间:
2021-6-1 23:51
主要还是接种密度要摸索一下
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