干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 培养原代细胞，可能污染了，不知是哪种污染？请大神指教 [打印本页]
作者: fenlichong    时间: 2015-8-24 19:41     标题: 培养原代细胞，可能污染了，不知是哪种污染？请大神指教

本帖最后由 fenlichong 于 2015-8-24 20:06 编辑
) ~/ c8 i# I, h2 c+ a1 u' V7 X4 w& s, M
培养的原代细胞，养到第6天，开始换液，发现镜下长满了很多密密麻麻堆积的小未知物，400倍光镜图片如附图所示，贴壁或轻微贴壁生长，个头比红细胞小很多，约是其体积的1/4或更小，未知物基本不游动或轻微晃动。培养基清澈不浑浊，但颜色稍变黄，尚未发现悬浮的絮状团块，不知是否真菌污染？以前从未见过这种污染，盼指教，多谢。 污染1.png 污染放大.jpg

图片附件: 污染放大.jpg (2015-8-24 19:54, 361.43 KB) / 下载次数 446
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NzE2MTR8NzgzMGRhZGV8MTc0ODcyMDMxM3ww



图片附件: 污染1.png (2015-8-24 19:59, 763.12 KB) / 下载次数 438
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NzE2MTV8MjBhZTI4MDJ8MTc0ODcyMDMxM3ww

作者: liuyul03    时间: 2015-8-24 21:18

个人认为是真菌污染
作者: yinfuhua    时间: 2015-8-25 06:50

回复 fenlichong 的帖子0 r; A0 m: k9 X6 J8 o* c' r

* w# d+ `7 f# {8 {( r' n4 G  F基本可以确定是酵母样菌污染。做一下革兰氏染色，可见革兰氏阳性卵圆形。照片已经可以见到芽生孢子了。
作者: sdwzg119    时间: 2015-8-25 09:11

yinfuhua 发表于 2015-8-25 06:50
  C9 u% t! P: ?回复 fenlichong 的帖子
5 E& G% s! D/ B) {( B, g* H9 h1 M7 D$ C$ }/ [3 T& |. B
基本可以确定是酵母样菌污染。做一下革兰氏染色，可见革兰氏阳性卵圆形。照片已经 ...

8 I% L- i& h& T! T  |) c同意这种判断，非常像酵母菌
作者: zgzy    时间: 2015-8-25 10:35

建议楼主尽快处理培养箱，真菌污染不容易处理彻底，因为孢子不易处理干净。可以先喷洒酒精，再用双氧水擦拭托盘表面，同时置于超净台紫外照射，同时培养箱要启动高温自净程序。
作者: tingting2113    时间: 2015-8-25 10:45

图片不是特别清晰，但是判断应该是污染了，如果是真菌污染，以图中的大小，应该可见絮状了吧，个人没有亲眼看过酵母菌污染的情况，不敢确定。
作者: 月_幻影    时间: 2015-8-25 10:46

应该是真菌污染，建议LZ尽快处理。
作者: chenjxcd    时间: 2015-8-25 10:47

感觉是酵母感染
作者: beyond2008    时间: 2015-8-25 11:36

回复 fenlichong 的帖子% B# O9 p! g0 o

. ?  l4 L% o. M7 t7 @5 U) o; R% I酵母污染，以前遇到差不多的情况。这个好像没有什么好办法去除。
作者: fenlichong    时间: 2015-8-25 12:45

多谢大家的热心解答，仔细看图片，是很像酵母菌，我过几小时后看到未知物长得更密集，镜下看已成为黑色密集状，为防止扩大污染，就喷酒精后丢掉了， 污染图片.jpg 非常感谢。

图片附件: 污染图片.jpg (2015-8-25 11:37, 524.2 KB) / 下载次数 388
http://www.stemcell8.cn/forum.php?mod=attachment&aid=NzE2MTZ8YzYyMjBkMWJ8MTc0ODcyMDMxM3ww

作者: fenlichong    时间: 2015-8-25 12:50

回复 zgzy 的帖子9 \' y- ?0 |6 r/ t
& Z" ?) q$ d; g; x) t- {3 ~
好的，非常感谢。
作者: fenlichong    时间: 2015-8-25 12:51

回复 yinfuhua 的帖子3 V) I; q3 K% r3 |  r
) ~9 h# }8 ^6 {. g2 V
多谢您，是很像酵母菌。
作者: deshenglll    时间: 2015-8-25 13:30

回复 fenlichong 的帖子
9 s( |' Z4 X. ^2 j2 x/ K) f5 f" s1 d3 o
应该是球菌。培养箱消毒阿。要想彻底点可以加点过氧乙酸
作者: wf78365421    时间: 2015-8-25 14:25

白色念珠菌
作者: 小冬子    时间: 2015-8-25 15:21

请问造成这种菌感染的原因主要是哪些呢？
作者: 121qwq    时间: 2015-8-26 10:29

真菌污染，链球菌
作者: zjhzxp926    时间: 2015-8-29 20:34

这个看上去是酵母污染了
作者: edwardellen    时间: 2015-9-28 15:31

回复 fenlichong 的帖子" h* N4 o& W& F6 `/ R0 [4 y. @' s& S

0 Z) ?5 ]/ H$ U: a: ]: [! ?我们这边处理污染的细胞是加硫酸铜溶液，如果没有配溶液的话，可以直接弄点硫酸铜粉末加到培养皿里，不用太多，这样处理是比较安全彻底的。
作者: sdfengxuan    时间: 2015-9-28 17:09

学习
作者: playboy723    时间: 2015-10-8 10:36

我总怀疑出现这种情况是由于实验室有人有脚气，手上和其他物品也被污染了，所以我总是定期消毒实验室拖鞋和衣服，进细胞间从不裸手接触任何物品。



欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5