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标题: 脐带间充质干细胞培养：在原代培养过程中，多少天传代一次合适呢？每两天换液合适吗？ [打印本页]

作者: stmcell 时间: 2015-9-10 21:13 标题: 脐带间充质干细胞培养：在原代培养过程中，多少天传代一次合适呢？每两天换液合适吗？

本帖最后由细胞海洋于 2015-9-11 07:56 编辑

在原代培养过程中，多少天传代一次合适呢？每两天换液合适吗？

作者: tingting2113 时间: 2015-9-11 08:44

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多少天传代应该取决于细胞的生长状态，一般长到80%~90%就可以传代了。换液也是如此，而且多长时间换液也和你加入的培养液的量有关，可以根据培养液的颜色判断是否需要换液。我们一般3~4天换一次，根据具体情况及实验要求。

作者: he_liang 时间: 2015-9-11 09:12

同意，主要是由细胞的生长决定，如果状态好的，一般原代培养4天左右可以传代了

作者: get0715 时间: 2015-9-11 09:42

首先你没有说明你是用什么方法培养的原代，是组织块法还是酶消化法。如果是酶消化法那就要你自己根据细胞的生长情况而定，换液不需要那么勤，可以适当补液。如果是组织块法，那么就在4或5天时半量换液（或者就直接加入新培养基），在10天左右的时候全量换液，根据细胞生长状况，如果爬出的细胞较多就可以早一天换液，如果细胞很少，就多等一直两天。大概在14天左右的时候就可以传代了。通常组织块法很不均匀，要看有大部分局部细胞已经汇合了，就要传代了，一定要根据自己的情况而定。

作者: wf78365421 时间: 2015-9-11 09:49

3天一次

作者: 本心 时间: 2015-9-11 13:04

2天正好

作者: colins 时间: 2015-9-15 10:08

如果你用的是组织块法的话，建议你不要等到贴壁满80%后在传代，原代细胞长的慢，60%-70%传代家可以，不然之前长出来的就会老化的很厉害

作者: woshibotao_01 时间: 2015-9-15 15:07

细胞不多时换液不要太频繁，大概4-5天换液即可，等细胞集落很多时可以适当缩短一下时间。

作者: 121qwq 时间: 2015-9-16 09:33

两天一次

作者: 克拉克冰点 时间: 2015-9-29 15:23

看细胞生长的状态喽，长得很快两天就可以换，但是一直没怎么变化就换液还有可能把细胞洗掉，不过一般都是三到四天吧。

作者: edwardellen 时间: 2015-9-29 21:43

看你是什么方法获得的细胞，还有就是你的细胞是第几代。, z: w2 x" O6 x5 [1 L
细胞密度达到70-80%的时候就可以传代了，密度再大，细胞状态就不会太好了。
一般刚分出来的细胞会按着1:3或者1:4传代，P2代以后，一般是1:4或1:5传代。
细胞状态好长得快，也可以1：6传，但一般都是周五要休息了才这样做。" s$ ]+ G4 P7 r6 x* f* [: l4 }$ \
大概每隔两到三天处理一次，看细胞状态决定是否传代还是仅换液，也就是一周两次处理细胞。

作者: caustic 时间: 2015-9-30 11:07

这个要根据细胞爬出贴壁情况考虑，我们实验室一般7d换第一次液，观察细胞爬出贴壁情况，如果细胞有爬出，再每隔2-3d换一次液，' t( d% ^4 I9 r s
等到细胞融合度合适时就可以进行原代消化了。

作者: ywx6302706008 时间: 2015-10-24 17:53

基本长满就可以传代了，没有固定时间的，两三天换液一次就行

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