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标题:
关于CIK细胞数量问题的请教
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作者:
海北
时间:
2015-9-16 08:36
标题:
关于CIK细胞数量问题的请教
在培养CIK过程中，发现第0天细胞数量比第四天的细胞数量多或差不了多少，请前辈指教这是为什么？
作者:
luoan
时间:
2015-9-16 11:14
培养基颜色有没变化，如果没变化的话应该是细胞没增殖。可能是在培养体系中含有一些东西抵制了细胞的生长，分离的时候有没异常？有没有加自体血清，有些病人血清中会有一些东西，或者还残留一些没灭活的补体，抵制细胞生长。解决办法：将细胞离心，弃掉上清，换一个培养瓶重新培养，不加病人血清。你可以试试。
作者:
海北
时间:
2015-9-16 15:25
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luoan
的帖子
5 j2 \% k- g4 [7 o
! a4 a1 E* \+ X" p
培养基颜色变黄了，用的自体血浆也经过灭火。我又换了个瓶子，看着还行。我认为第0天计数的是各种细胞，第四天是因为，经过几天很多不是CIK的开始死亡的原因啊！你们一般计数会计数第0天吗
作者:
鸵鸵
时间:
2015-9-16 15:55
出现这种情况是正常的，第三天和第四天细胞数目有时候比第0天不增反降的，因为刚分离出的细胞种类比较杂乱，经过培养，一些细胞不适应培养体系会死亡，我们在培养过程中摸索出的规律是第5-9天是增殖高峰期，补液和因子的添加要跟上细胞生长的节奏
作者:
海北
时间:
2015-9-16 16:50
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鸵鸵
的帖子
7 f/ V% P9 _3 Q; `3 T
" H; ^/ [- E( U* l
哦！非常感谢
作者:
a123567
时间:
2015-9-17 08:06
CIK细胞培养前几天是诱导阶段，增殖速度慢，像我们培养CIK，前面几天只能增加2-3倍，培养基稍微变黄，这个都是正常现象。 如果是有细胞大量死亡的话，那么就是你的培养环境不对，营养不足等问题。
作者:
海北
时间:
2015-9-17 10:51
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a123567
的帖子
5 j0 T; q! W$ Q: \1 G/ O
" r; S( e) P j' e
哦！明白了 。谢谢你！
作者:
海北
时间:
2015-9-17 10:59
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a123567
的帖子
- l$ p1 v8 B! Z; X
) I) E) W; D2 u
你说的前几天具体是几天增加2-3倍
作者:
a123567
时间:
2015-9-17 12:13
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海北
的帖子
+ d) t/ e$ p8 E9 R2 l
0 X+ g, f, e8 `* N F5 J
前4天，转袋计数，细胞扩增有2-3倍。
作者:
小刘
时间:
2015-9-17 12:19
看是否有污染，如果没污染，培养基变黄，细胞变大，这是免疫细胞的正常现象，没事
作者:
海北
时间:
2015-9-17 15:36
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小刘
的帖子
' H2 ]5 A9 w8 n, f3 P
! \5 I: v% { t4 L5 U( |( h
没有污染，细胞看着状态挺好的，就是没有团状
作者:
海北
时间:
2015-9-17 15:38
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a123567
的帖子
/ L/ H: C. k! G
3 y8 S8 i& |8 |) C \& s5 ]" F
那你们还挺好的呢，我养的前四天几乎没有增值的，反而还有点下降呢
作者:
chenguangyu
时间:
2015-9-17 15:41
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海北
的帖子
+ @5 V2 j H; W
T: D& g, j" p+ S/ [9 V) N3 z
第四天的细胞肯定会明显比第零天的多。你的在培养过程中肯定是出问题了。
' H' I z( e9 }' U" d" i( f' A* u
1.细胞有没有污染
7 A* o z6 L$ G
2.诱导CIK的细胞因子有没有忘记加的
7 P/ U0 Z$ o* @$ }8 V
3.原始的单个核细胞有没有问题
作者:
海北
时间:
2015-9-17 15:47
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chenguangyu
的帖子
% p( H2 T! h/ z( t. J
+ W1 }( s6 W- j2 l2 P
我的几乎没有变化，今天第7天细胞数就增加了很多，细胞章太也挺好的。细胞因子都加了，
作者:
wuhuaguo88l
时间:
2015-9-19 07:07
刚开始细胞长得慢，一般在3-4天后，出现集落，细胞进入指数期；若细胞数不多的话，原因会很多，要么血清较少，白介2没加等
作者:
本心
时间:
2015-11-2 13:19
培养前期有个细胞适应期
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