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标题: cik培养CD56+表达率太低 [打印本页]

作者: momoenn 时间: 2015-9-25 23:19 标题: cik培养CD56+表达率太低

如题，最近对cik进行流式细胞检测，CD56+表达太少，导致CD3+CD56+双阳性比率太低，可能是什么原因造成的呢？另外自体培养的cik，CD3+CD4+/CD3+CD8+>1，为什么呢？

作者: momoenn 时间: 2015-9-28 12:46

没人回答，自己顶一下，希望大神可以解答一下

作者: lele 时间: 2015-10-14 16:16

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双阳性低，那收获后细胞总量是不是挺高的？CD4/CD8大于一，是不是免疫疾病患者？

作者: momoenn 时间: 2015-10-14 17:05

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收获后细胞总量挺多，现在60ml左右的脐血最后能收获8*10-9的细胞。这是为什么呢？

作者: Michael_HT 时间: 2015-10-23 11:56

CD3+CD56+表型低是低多少？现在做CIK细胞表型没有完全的标准，很难评判

作者: momoenn 时间: 2015-10-23 12:51

回复 Michael_HT 的帖子, u; s0 O- y9 {% i: o
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最近测流式，都在3%左右

作者: riverhe_87 时间: 2015-10-26 17:07

3%的值的确是挺低的了，我们做的cik也低，但至少都在10%以上，不高于20%。

作者: momoenn 时间: 2015-10-28 10:17

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那有可能是什么原因导致的呢

作者: zhengjianwei521 时间: 2015-10-28 10:23

原因很多啊，我们一般都在10-30之间，你可以尝试下延迟培养时间，一般情况下20天这个值会高点，还有就是你的包被配方。仅供参考

作者: riverhe_87 时间: 2015-10-29 11:34

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原因挺多的，1，可能你添加因子的浓度不够；2，培养时间，你培养多少天测得，你可以设置一个天数差，取样测下流式比较下；3，因为我们是抽病人外周血培养的，也可能跟病人本身细胞质量有关。

作者: momoenn 时间: 2015-11-2 11:31

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我们现在CD3+浓度是50ng/ml。IL-2是500U/ml。一般都是在14天以后检测。这个和CD3浓度有关还是IL-2浓度有关呢？

作者: momoenn 时间: 2015-11-2 11:32

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谢谢

作者: riverhe_87 时间: 2015-11-3 16:03

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浓度低了些，我们IL-2是1000U/ml，跟着两个因子都有关系，你应该还添加了IL-1a和INF-γ吧。

作者: momoenn 时间: 2015-11-4 15:03

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我们还添加了IFN-r，浓度为1000U/ml。只加了这三种因子，没有加IL-1a

作者: riverhe_87 时间: 2015-11-4 15:24

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可以考虑加点IL-1a。。。我们都加。但是我也一直怀疑我们的浓度低了还是怎么的，CD3CD56一直也就20%-30%，偶尔有高的，但是特别少

作者: chenguangyu 时间: 2015-12-2 15:30

增加培养时间试试

作者: 醉心科研 时间: 2015-12-8 10:32

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这个IL-1a是只加一次吗，还是以后每次补IL-2都同时加？

作者: guanjun1314 时间: 2015-12-8 11:04

是不是时间或试剂影响，有没对比试验

作者: 飞翔的烨 时间: 2015-12-31 18:33

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能否告知下因子浓度和牌子

作者: zmfang555 时间: 2016-2-24 13:59

CD3+CD4+/CD3+CD8+>1很少见，一般是患者血液异常或恶性血液病会遇到，我们一般是CD3+CD8+>80%,CD3>90%,这可能跟你的培养方案，还有用的试剂品牌有关。

作者: 我是传奇 时间: 2016-3-18 15:21

培养基的问题，用的什么品牌的？还有测CD3CD4 CD3CD8的时候有没有做荧光消减和补偿
比值大于1也要看两个分别是多少。

作者: 小沙弥敲木鱼 时间: 2016-3-21 11:09

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增加培养时间对于细胞的比例有影响么？

作者: zhengjianwei521 时间: 2016-3-21 12:51

换换培养基，GT551H3挺好，会增加cd3cd56,一般情况下培养20天会达到最高

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