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标题: 骨髓分离后种植第二天出现的情况 [打印本页]

作者: 121qwq 时间: 2015-9-27 11:58 标题: 骨髓分离后种植第二天出现的情况

本帖最后由 121qwq 于 2015-9-27 11:59 编辑
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麻烦事又来了，最近几例分离骨髓后都出现不同程度的黑点，怀疑是污染。但是想不出来哪里出现的。用同样的培养体系培养其他没黑点的细胞照样没问题，请教大家有出现过这种现象吗？: n. u8 ?/ `8 S( {
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作者: tingting2113 时间: 2015-9-28 09:08

“同样的培养体系培养其他没黑点的细胞没问题”说明所用培养液、培养瓶等没有问题，甚至环境也没问题，那是不是这几批样品被污染了呢？

作者: 121qwq 时间: 2015-9-28 10:05

回复 tingting2113 的帖子! {* W+ j' M9 X+ b4 K* r3 J
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我问过取骨髓的朋友，问过流程基本上没什么问题，都是用新的，但是具体怎样取我也没参观过，有点血腥，不敢去

作者: wuzhoulingxiao 时间: 2015-9-29 16:52

感觉不太像细菌污染，细菌会导致培养基黄、浑浊，细胞大面积漂浮。感觉像细胞、组织碎片太多或黑胶虫污染。

作者: 疯子 时间: 2015-9-29 18:19

我之前做培养的时候也出现过这种情况当时还以为是污染但是有坚持养了几天勤换着培养基黑点就都没了后期也没有异常不知道是什么情况0 C# }( I4 G. ^+ m

作者: caustic 时间: 2015-9-30 11:09

一旦在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，
微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果培养基未变黄，只是生长状况不好，可能是黑胶虫污染，避免黑胶虫的污染，首先要确定血清是否新鲜，还有血清不是反复冻融。
如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
（1）细胞生长过老，破碎的细胞残骸；
（2）血清质量不好，反复冻融的结果；
（3）配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；8 r4 p! Q! z& ~6 n5 r( I6 v
（4）配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；
（5）培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

作者: genhaoxin 时间: 2015-9-30 11:52

是培养人的骨髓吗？用的培养体系一样，加不加自体血清？看着不像是污染，换液时洗涤2次，继续培养。

作者: 121qwq 时间: 2015-10-8 08:40

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人的

作者: playboy723 时间: 2015-10-8 10:55

细胞碎片或者是其他的代谢废物，一般换液后加大血清浓度，细胞状态好了后自然会消失的。可以考虑半量换液

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