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标题: 2型胶原酶可以用含5%FBs配置吗 [打印本页]

作者: huqiao1649    时间: 2015-10-15 17:58     标题: 2型胶原酶可以用含5%FBs配置吗

原代培养消化组织块,因消化的时间比较长,看文献为了减少胶原酶对细胞的损害,加入一定的血清,这样可以吗?
作者: coffee.cat105    时间: 2015-10-16 10:17

可以啊,我每次都这么干,效果不错
作者: aulenuyah    时间: 2015-10-16 11:33

是可以的,也可以加入适量BSA或者葡萄糖,效果也不错
作者: huqiao1649    时间: 2015-10-16 12:55

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1 d& s0 r3 \/ \' N% T, f% [
" [$ o! X) f+ y/ i5 l不是加血清抑制胶原酶消化的吗?消化效果会影响吗》
作者: baby00000003    时间: 2015-10-16 13:21

学习了~
/ [& ^+ U# Q! p$ A; [2 O; l. p俺都不曾用过这个酶~
作者: 鸵鸵    时间: 2015-10-16 13:59

看你消化多长时间,一般要过夜的话最好加点血清以防过度,多的话是会阻止消化的
作者: aulenuyah    时间: 2015-10-16 16:27

回复 huqiao1649 的帖子$ C( A) I: ]4 l3 j" b2 h
. b' r5 N+ x3 f' A. Q
用血清是无法抑制胶原酶消化的,一般来说,胶原酶消化处理后,需要反复清洗细胞,去除胶原酶。很多配制胶原酶的配方中都会含有血清成分,而且适量的血清成分会促进胶原酶的活性。
作者: coffee.cat105    时间: 2015-10-20 11:19

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0 U* R, d& z6 N8 A2 K4 N: k' A6 R- C. q
没有特别的强的抑制作用,我试过,消化效果差距不大,可能时间延长一点,不过我是消化的时候再加血清的
作者: huqiao1649    时间: 2015-10-21 09:04

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+ k# \4 u$ w& F' y4 Q, X" z4 K4 O
ok,我试试!  谢谢
作者: 蚂蚁上树    时间: 2016-1-18 16:48

回复 aulenuyah 的帖子1 H5 U- K! `% C: f7 z

; Q7 X: ^0 C5 L( J请问你一般用多大浓度的血清呢?
作者: 细胞海洋    时间: 2016-1-19 09:59

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, Z, J/ a  Z" f' ~* N& }. k# Z  e
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作者: aulenuyah    时间: 2016-2-26 09:19

回复 蚂蚁上树 的帖子. q$ Q1 A& {- j+ n. a5 @

- N7 \1 c* l* B0 [  X6 w; [好像一次消化有几滴血清就可以了,不需要太多。也可以加一点BSA,效果也不错
作者: jddakui    时间: 2016-3-1 09:13

胶原酶不会被血清终止活性,但是配制没必要加入血清吧,毕竟血清成分也比较复杂
作者: 田甜    时间: 2016-5-16 16:51

好像血清不能抑制胶原酶的消化,反而是促进其消化能力的。. D2 Y) j8 U) i! P0 m/ U& }/ r* U
之前用2型胶原酶消化组织1小时,对比过一次,加血清以及不加血清的原代培养的对比。原以为加了血清的那组,细胞活性会高一些(以为血清起保护作用),结果却相反,显微镜下,加了血清的那组,细胞都消化成单个单个的,但活率基本为零,没有细胞贴壁,没有加血清的那组,有单个细胞,也有细胞团块,接种后,细胞贴壁正常。应该能说明血清的作用,希望大家可以重复一下这种对比试验,确定血清的作用。
作者: 网瘾少年    时间: 2016-5-17 15:33

可以的,我试过
作者: veda327    时间: 2016-5-17 17:23

添加适量血清,或者适当降低胶原酶的浓度也可以!




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