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标题: 细胞被什么污染了，求解 [打印本页]

作者: yiwuya007 时间: 2015-10-16 08:53 标题: 细胞被什么污染了，求解

见图片，细胞从大鼠骨髓冲出来，培养48小时，贴壁细胞会越来越少，培养基变黄了，显微镜下细胞外未见小的微生物。
细胞质内在显微镜下见到透光性好的小微生物，聚集在一起，细胞濒临死亡，看见小的微生物从胞质内向外流出来。10倍和20倍镜下都能看见。
大家看看，这个是什么污染了。$ p2 {2 U! h7 D, Y. F {3 `2 r
开始以为是支原体，用了抗支原体的药，没有一点效果。常规的双抗（青链霉素）都加了。; @% b. }2 f9 F
一直困扰着，细胞养不出来了，呜呜呜

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作者: 鸵鸵 时间: 2015-10-16 13:57

从图片细胞状态看像真菌污染，但从胞质往外流出的情况没有观察到过，所以不能确定

作者: 顾哲 时间: 2015-10-20 14:35

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你可以放到40倍镜下多看看，我就是在40倍镜下看到大肠杆菌等

作者: hdna287730127 时间: 2015-10-20 17:00

酵母菌？或其它球菌？

作者: snowny007 时间: 2015-10-21 09:27

看着不像污染，如果是可见细菌污染，培养后期不会如此纯净，更不会是真菌。支原体需要检测才能确认，因为抗支原体试剂不一定就有效。

作者: yooung 时间: 2015-10-26 16:35

不懂。不过细胞死亡，为什么一定要是污染，会不会是培养基的问题。

作者: yiwuya007 时间: 2015-10-28 20:49

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试过不同品牌的培养基，也试过不同公司的FBS，结果都是这样的

作者: yiwuya007 时间: 2015-10-28 20:50

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对，培养液没有浑浊，只是培养48小时就变得非常黄

作者: snowny007 时间: 2015-10-29 10:03

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支原体污染是看不见的，细菌、真菌污染做一下微生物检测就知道了，还有个我自己体会的小技巧，细菌污染严重的话培养瓶内有一股刺鼻味，像药剂。如果都没有的话，那就说明没污染，培养基颜色变化与ph值有关，想想是什么导致了ph值变化，加了过量血浆还是有杂细胞消耗营养等等

作者: feifangli 时间: 2015-11-5 10:09

感觉不像是污染。会不会是其他原因导致细胞状态不好。

作者: zjhzxp926 时间: 2015-11-7 20:33

这个不像是污染，可能细胞对培养条件不是很适应，生长状态不好。

作者: z_dawson 时间: 2015-11-9 18:21

细菌污染，增殖很快，培养液会变浑浊，有可能是环境问题。

作者: Mr.PHOENIXX 时间: 2015-11-10 15:18

不太像污染，培养基变黄后换液继续养着试试

作者: Tim 时间: 2016-3-27 23:46

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不应该是污染，培养基选择不对。我遇到过类似的情况

作者: maokai345 时间: 2016-4-4 11:40

看图片觉得很有可能是普通细菌感染，你的抗生素效果可能不行，一般antibiotic用过之后细菌就不会动了，再换换液就会少一些。细菌会把细胞吃破，就流出来了

作者: pauldong 时间: 2016-4-22 14:48

可能是培养基中缺乏某种物质，细菌污染的话会浑浊，有异味；支原体污染不会这么快就显现出来；是不是血清有问题或者用的不含谷氨酰胺的培养基然后忘记加谷氨酰胺了

作者: sithbj 时间: 2016-4-22 15:04

不像污染，更像是细胞在成批死亡，那些小颗粒是调亡的细胞分裂成的Lysome。实验条件有一个或若干个严重错误。找找吧。可以同期培养一个容易养的细胞系看看。

作者: veda327 时间: 2016-4-25 12:37

真菌污染吧，一般实验室细菌污染会发展的比较快，特征明显，而真菌污染在培养基中的表观现象会比较少！1 {! l9 ~" W' H6 M
支原体污染光学显微镜下是无法观察到的，再说支原体污染很常见，80%的实验室的细胞都会有，及时污染了一般问题也不会很严重！

作者: meredith603 时间: 2016-4-27 15:33

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真菌污染才是最容易看出来的，有些真菌肉眼就能看见，培养基上漂浮一大堆絮状物。支原体污染严重的显微镜下能看出来，而且支原体污染会显著影响实验结果好不好！

作者: 晗晗 时间: 2016-5-6 14:45

应该不是污染了吧，可以每天换下培养液试试

作者: 枫之叶影 时间: 2016-5-12 13:43

我们碰到过长成这样的细胞，应该不是污染，可能是培养基或者是培养环境有问题

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