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标题: 细胞污染时会出现哪些情况？ [打印本页]

作者: lijie_suc 时间: 2015-10-20 13:27 标题: 细胞污染时会出现哪些情况？

细胞培养时，除了要求样品的采集要无菌外，周围环境的洁净程度也至关重要，不然就免不了被污染。相信不少培养细胞的亲们也都遇到过细胞污染的情况，那么细胞被污染后，培养液或细胞本身会出现哪些情况呢？各位请踊跃参与讨论~

作者: baby00000003 时间: 2015-10-20 13:59

网上图可多了～

作者: 顾哲 时间: 2015-10-20 14:17

回复 baby00000003 的帖子

我的umuc细胞有一次被大肠杆菌污染，在显微镜下观察时，整个培养皿里都漂浮的是大片大片的散装结构，在显微镜下观察时，可以看到在40倍镜下有杆状生物在扭来扭去，转来转去

作者: baby00000003 时间: 2015-10-20 15:28

回复顾哲的帖子; T R% g( L- t$ _, X( e

流沙状，而且培养基也会黄吧（有酚红的话）～

作者: tingting2113 时间: 2015-10-20 16:58

回复 lijie_suc 的帖子7 M3 }1 |1 A9 g9 m
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有一次的实验环境较差，隔壁竟然养金葡，不出24小时，就能看见培养基中一串一串的，晃动培养基会动。前几天，细胞传代，细胞已经长满了，但是背景中会有小黑点，很多，肉眼看培养液浑浊，晃动像是有细微的白色小颗粒，培养液并未变色。

作者: lijie_suc 时间: 2015-10-21 09:49

我们实验室这边没有培养细菌的，但是有次也是发现污染了，刚养了两三天就发现24孔板的其中一个空培养液表面有大片的乳白色的，其他孔都还是清亮的，虽然还不清楚是什么就果断放弃了那个孔

作者: wuhuaguo88l 时间: 2015-10-23 14:01

培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变.污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡.

作者: 积极沉默 时间: 2015-12-9 19:11

培养液会浑浊。在显微镜下面，会看到会动的小虫子游来游去

作者: swtarron 时间: 2015-12-10 08:59

第一眼能看到的应该就是培养基颜色的变化（一般培养基里都加的有酚红），一般会变黄；第二就是在显微镜下观察时会看到絮状物、游动的小点等现象，不同细菌的污染看到的情况有所不同。

作者: yooung 时间: 2015-12-10 11:05

真是个好问题。MARK一下。

作者: lijie_suc 时间: 2015-12-12 10:18

细菌污染时培养液大多变浑浊、色黄。霉菌和念珠菌污染时清亮、色黄，霉菌污染可见菌丝、孢子；念珠菌污染可见长短不一的菌链；

作者: zsykdx 时间: 2015-12-12 10:41

肉眼看培养基变浑浊，显微镜下看有黑色的一团一团

作者: 海南小石 时间: 2015-12-12 19:25

如果染菌，很可能就培养不出细胞了

作者: woshibotao_01 时间: 2015-12-14 09:18

细菌污染，培养液有酚红的话，会变黄，浑浊，显微镜下可见大量游动的“小东西”。( l# }9 Q% m( P3 L# B" O: _
真菌污染培养基会呈流沙状，培养基浑浊但是有时不变黄，镜下可见白色亮点和菌丝。有时真菌污染会看不出来。
霉菌污染培养基不变色，有时不浑浊，但是会在里面看见一团团的带菌丝的霉菌，很明显。
黑胶虫还没遇到过，不便回答。

作者: 三月桂花香 时间: 2015-12-15 14:47

被污染了，严重的话肉眼可以看出来的，培养基浑浊变黄~

作者: CART 时间: 2015-12-15 19:39

贴壁细胞：大片棉絮状漂浮物
悬浮细胞：培养基变浑浊

作者: fenlichong 时间: 2015-12-16 16:44

细菌污染一般72h内可见培养基变浑浊，颜色黄至黄绿，注意与代谢的黄不同，镜下可见雾状小黑点，如不确定，可调整细准焦螺旋，高倍镜下可观察到细胞悬液中有蠕动的小黑点；真菌污染前期不易观察，后期长出菌落则较明显，培养基浑浊或无异，霉菌的话肉眼可见棉花团状的菌落漂浮，镜检可见丝状或树枝状菌丝，一般需密切观察细胞状态，发现果断丢弃，防止扩大污染，酵母菌的话镜检可见出芽生殖；关于黑胶虫，之前有观察到细胞中长出黑色云雾状做布朗运动的小东东，低倍镜下可见，比细菌大，培养基和细胞状态短期无变化，后来黑雾团增大便丢弃了，与网上看到的游动速度很快的那种不同，不清楚是什么污染；支原体污染不确定，一般发现细胞状态不好，颗粒不饱满，形态不清晰等，最好及时冻存。

作者: zsykdx 时间: 2015-12-17 16:31

回复 lijie_suc 的帖子( o2 x% b; \8 _) n* Z
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要看你染菌的种类，真菌类的话，可以见到菌丝分支，培养基不会变黄。细菌的话，培养基会浑浊，而且在高倍镜下，细胞间隙都是细菌在做布朗运动。

作者: fenlichong 时间: 2016-9-12 10:15

一般状态好的细胞镜检，细胞形态正常完好，饱满，立体感强，透明度大，折光强，而状态不好的或被污染的细胞，形态可能不完整，细胞不亮，胞质流失，出现空泡和很多颗粒物，有的细胞会趴在瓶壁上。被细菌污染的细胞一般培养基会浑浊，镜下看到很多雾状颗粒；被真菌污染的细胞培养基可能浑浊也可能不浑浊，镜下可看到菌丝或真菌孢子，不过早期不易发现。操作时要注意无菌。

作者: sfnana 时间: 2016-9-12 13:35

细胞污染主要有：1.细菌污染，培养液变色，变浑浊，镜下可看到原状、杆状的细菌不听游动。
                        2.真菌污染，培养基颜色不变，肉眼可见菌丝。
                        3.支原体污染，培养基颜色不变，也不浑浊，镜下但不到。但是细胞生长缓慢，细胞形态变差。这个检测需要做PCR检测。9 ]3 G& e% d& b+ C# R5 {
                        4.黑胶虫污染，培养基外观无变化，高倍镜下出现黑点，做布朗运动。与细胞竞争性生长。出现原因目前并不明确。! J0 U# r$ V9 _
总之一旦出现污染，如非珍贵细胞样品，扔之。同时加大对环境卫生的消毒工作。

作者: LVXUEYAN1101 时间: 2016-9-13 09:16

细菌污染一般培养基会迅速变黄，变浑浊；真菌污染，培养基一般颜色不会变化太严重，但是时间长了显微镜下可见菌丝，然后培养基中会出现絮状漂浮物

作者: 风倾颜 时间: 2016-10-14 09:28

细菌菌污染：一般48h内可见培养基变浑浊，培养基颜色发黄。8 @* u- D2 \' U8 x( J; }
真菌污染前期不易观察，培养基浑浊或无异，后期长出菌落则较明显，养基中会出现絮状漂浮物，镜下可见菌丝。4 ^2 y$ G# b4 a4 P, p& W e
霉菌的话肉眼可见棉花团状的菌落漂浮，镜检可见丝状或树枝状菌丝。' h( R+ ^: h$ i0 |' W1 G" }
发现污染要及时处理掉细胞，对整个实验室环境进行彻底的消毒处理，然后检测实验室的浮游菌和沉降菌，达标后方可进行其他的实验操作，以免污染其他的细胞。

作者: sunny2829 时间: 2016-10-14 10:47

      细胞被污染后，刚开始会觉得培养基有很多絮状的东西，细胞膜会出现黑点，40X镜下会发现有球状或者线形的生物浮动，有别于布朗运动。
      培养基浑浊，变黄，说明细胞已经无法挽回的了。1 C2 O/ h: o; ~; i6 t2 [0 S$ e" n
      个人经验。

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