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标题: CIK细胞的冻存 [打印本页]

作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-26 11:58     标题: CIK细胞的冻存

想将培养的脐带血CIK细胞冻存起来,大家是否可以将冻存方案分享
作者: wuhuaguo88l    时间: 2015-10-26 13:50

10 % DMSO + 90%胎牛血清,最好用好一些的血清
作者: aochongyu    时间: 2015-10-26 14:56

大家都不加基础培养基,仅仅只加血清和DMSO??
作者: chenguangyu    时间: 2015-10-26 15:59

10 % DMSO + 90%胎牛血清.如果想节省血清用50%培养液+40%胎牛血清+10%DMSO也可以
作者: Michael_HT    时间: 2015-10-27 11:16

冻存大部分都是10%DMSO+90%FBS,再就是买现成的冻存液但成本很高,100ml的价格1500
作者: 杨知涵    时间: 2015-10-27 15:29

冻脐血CIK用90%胎牛血清成本太高吧,可以适量换成培基
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-28 08:56

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6 v! |# t2 o: l- J+ ^0 C) J
( }  B, g3 _; |( O/ z- p3 e请问一下冻存液你们用的时什么品牌的,能不能给我个连接。我们是做回输人体的
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-28 08:57

我们最终要会输给人,胎牛血清恐怕不行吧
作者: 本心    时间: 2015-10-28 09:13

用白蛋白做保护剂
作者: Michael_HT    时间: 2015-10-28 10:05

回复 鑫鑫向荣 的帖子- r8 Y: z5 k* I" n9 ~. n  y
! C, Y- F- I- H7 U. \4 j$ K
我们原来也是做临床回输,冻存也是这样冻存的。日本ZENOAQ这家公司是做冻存液的
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-28 14:35

回复 Michael_HT 的帖子! T% q0 z& E  e, K7 ?. P8 H/ R

, ?( o- y: H' J# g1 A3 s那你们有那么多的自体血浆吗
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作者: Michael_HT    时间: 2015-10-28 15:20

回复 鑫鑫向荣 的帖子6 _) E2 v% Q. J9 M1 J: T% ~
1 o- ]+ a, D" I4 z; a# E. ]
不是自体的呀,就是用的胎牛血清冻的
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-28 15:48

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1 q0 \0 v- q  \) x; t- k0 s# l, D3 V8 H
用胎牛血清还能给病人做会输吗
6 N$ m) A+ Z" ~- j
作者: Michael_HT    时间: 2015-10-29 08:47

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& M8 B/ m" c! R3 ?8 m# X$ d3 \+ y
+ w' ~! n$ t( W  V% X2 u* s可以回输,复苏不是要清洗的嘛,还有就是最后做制剂的时候也会清洗细胞嘛,清洗过后做过蛋白检测还蛮好的。而且现在市面上做细胞培养的多多少少都会加点血清进去培养
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-10-29 09:27

回复 Michael_HT 的帖子: Q5 g% e9 v( X* q
5 @" B+ c1 ~: ?- O* ^! }. C2 X
请问你们最后做的蛋白检测时什么内容啊
作者: haibara007007    时间: 2015-11-3 11:00

以前加培养液,现在都不加了,9:1血清加DMSO挺好的,活率不错
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-11-4 13:46

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; Y% X( K. G, v2 N; R
# \) U" T* Y1 \5 X2 v. e请教你们复苏后使用生理盐水洗细胞吗?要清洗几次啊?
作者: Michael_HT    时间: 2015-11-6 08:15

回复 鑫鑫向荣 的帖子- F' W* _$ g: z3 J2 N# U

& n) u- @8 q. r) ^. p! T复苏没有试过用生理盐水清洗,我都是用培养基清洗,这样对细胞有个适应过程,对后续的培养也好
作者: easternliu    时间: 2015-11-12 09:23

胎牛血清方案就不要推荐了,凡是做实验的都知道。可以买市售的成品冻存液,虽然贵一些,无蛋白无病原体风险,冻存效果也好。
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-11-23 10:04

回复 Michael_HT 的帖子/ k* _0 b1 E2 W! B7 `4 c
; ]/ J$ R, V% _4 g, J/ D& d
那请问一下你们在细胞培养几天的时候开始冻存,复苏后细胞存活率大概能达到多少呢
作者: 鑫鑫向荣    时间: 2015-11-23 10:08

回复 easternliu 的帖子
& q5 ~% _  h: t% r4 A' [8 v  N* x  [
那给病人回输你们用的哪家公司的冻存液冻存CIK细胞。我们现在也很纠结不知道时用哪种东村方案。据了解失眠销售的冻存液液只是在科研级别,都还没有达到临床应用的阶段。所以特别想知道你们用的试机和冻存方案。望不吝赐教!
作者: 细胞海洋    时间: 2015-11-23 10:37

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作者: Michael_HT    时间: 2015-11-23 10:46

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$ U. Z$ e( F: a! _
( C+ D* E! Z% ^: a2 n0 T7 C原先根据需求分几个阶段的,主要做的就是0天冻存、5-7天冻存,复苏细胞存活率要看分离的状态,存活率一般性都有60-80%以上
作者: easternliu    时间: 2015-11-24 12:04

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+ P5 n9 E" M) i* S% ~
3 K1 ~9 v; Z) I4 ]配方都是保密,抱歉不能分享。如果你们复苏后是洗了再回输的,或者培养一下再回输,市面上科研级别是没问题的,总归比FBS好。Stemcell好像也有,就是贵
作者: 小云龙    时间: 2015-11-24 14:45

如果上临床还是用10 % DMSO + 90%白蛋白吧,胎牛血清毕竟是异源物质,容易引起发热或者其他的临床症状
作者: zsykdx    时间: 2015-11-25 11:29

10%DMSO+90%FBS
/ p7 V$ e; w+ I  c; t* t+ X2 X10%DMSO+20%FBS+70%培养基1 F0 B* k1 e6 G) F0 C2 K9 C: F* e
10%DMSO+40%BSA+50%FBS
作者: yingfeixiang    时间: 2015-11-25 14:34

这个不能用胎牛。冻存保护液可以用10%DMSO与右旋糖酐,在加点10%白蛋白。
作者: 小馬    时间: 2015-11-26 10:30

临床回输确实得慎重,最好不要有异源的东西吧。做实验用的话其实普通的方案都可以,就当普通细胞冻存就好了。
作者: Anne_Yu    时间: 2015-11-27 09:31

我们也是直接用现存的冻存液冻存的。
作者: 18629958729    时间: 2020-11-23 14:18

想请问一下,冻存密度是多少9 x2 y% @6 e2 V# _8 }: y





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