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标题: B27血清替代物用于干细胞培养相关问题交流!!! [打印本页]

作者: gxbzjznn    时间: 2015-11-4 18:11     标题: B27血清替代物用于干细胞培养相关问题交流!!!

有没有人用过血清替代物B27替代血清加入培养基培养干细胞的。出来交流一下吧  我养的是乳腺上皮细胞,经两次悬滴(hanging drop)培养后,用B27替代血清加入培养基后,发现细胞出现如下情况,哪位高手可以出来指教一下,单从形态上看我这个还有可能是干细胞吗?谢谢
作者: watchen198891    时间: 2015-11-5 09:53

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+ u' A+ h+ \" c% O, k2 m" S0 `" m) \1 @, ?8 e) U  y* g; L
单从形态上看已经不像干细胞,是不是不好判断,但是你可以把现在的形态与逆之前养的干细胞形态进行比较,另外在进行多能性Marker的鉴定,这样就可以确定了。
作者: 花饶然    时间: 2015-11-5 10:08

B27不是用于神经细胞的培养的吗?你上的图里面细胞形态已经不单一,不好判断6 |2 q4 M0 g( x* A

作者: gxbzjznn    时间: 2015-11-5 12:07

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! W7 \7 }' s( w0 t3 F2 Q% w  e' A
( O& @- h! Q" K" d    B27是在神经元细胞培养中所用的添加物,能够维持神经元细胞长期体外培养,1 e$ M) J; `7 Q. W
因为神经元培养过程中不能使用血清所以用其代替,是专用于培养神经细胞的血清替代物,B27分装,是1ml、( T% P3 V) _. m
1ml的分装然后放在-20℃冰箱里,分装完后可直接配成50ml的培养基。
作者: gxbzjznn    时间: 2015-11-5 12:08

回复 花饶然 的帖子2 B% I& x& Y" G1 J2 B5 f4 d
! a9 r2 K. ]( s+ E
我这个是试做乳腺干细胞的纯化,经查有关文献显示:神经干细胞跟乳腺干细胞具有高度相似的特性!所以我才这么用的
作者: watchen198891    时间: 2015-11-5 12:37

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如果是维持神经干细胞的生长,B27的确可以,不过乳腺干细胞的培养,我没有做过,不好发表意见。
作者: gxbzjznn    时间: 2015-11-5 17:13

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1 ~, E4 H0 z: U  |- `$ v" q
& y# l1 ~3 ^: w- }3 U% V( ^- v是的,从形态上观察剩下的细胞的确跟神经样细胞很像(长条形)但的确有相关文献介绍到在乳腺干细胞的培养基中添加B27...
作者: watchen198891    时间: 2015-11-6 09:17

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这个不能光从形态学上去判定,还是去染色鉴定一下,Tuj-1,GFAP,MAP2等,你试一试。QQ号就算了。
作者: gxbzjznn    时间: 2015-11-6 10:43

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/ _1 J/ N% U  O2 U& A3 \/ q( s5 Q: w( D) T' I9 S9 ~
好吧 谢谢你




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