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标题: 间充质干细胞成软骨诱导怎么种板,,,,,, [打印本页]

作者: ych123    时间: 2015-11-21 18:39     标题: 间充质干细胞成软骨诱导怎么种板,,,,,,

各位亲有谁做过成软骨诱导啊,种板的时候应该怎么种?必须得像文献那样离心后不混悬,直接形成微小球种板吗,求高手指导
作者: baby00000003    时间: 2015-11-23 08:36

U底96孔板,2.5*10^5/孔,离心之后稍微吹一下,让细胞团漂得起来但是不散最好~
作者: ych123    时间: 2015-11-23 15:40

回复 baby00000003 的帖子: E, v" r2 f3 ~/ N7 v8 L6 `8 [
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好的,谢谢
作者: 夜光猫    时间: 2015-11-23 18:20

我们是直接在15ml 离心管里诱导培养的,离心后加入诱导培养基,第二天就可以看到底部沉淀变成球状了
作者: ych123    时间: 2015-11-23 22:20

回复 夜光猫 的帖子
5 h! n* n& S( k
6 T; W0 Y9 B3 e& a那个小球会漂起来吗?我的好像没有漂呢
作者: 夜光猫    时间: 2015-11-26 16:54

回复 ych123 的帖子8 Y% t$ y0 m) }( |% e) y
. B* P3 D: q5 L: W: J9 w
换液的时候动作轻柔,就不会飘起来,但是你能看到球状在哪里。它是自然沉底的
作者: ych123    时间: 2015-11-26 22:36

回复 夜光猫 的帖子. S9 B+ f5 }& O. o& m8 q% w6 x  G
( O6 ^- ?/ ?- Y0 [- N/ f8 S- m
看的到很小的一个,你们每次换液是用枪头把培养基吸出来吗?
作者: 夜光猫    时间: 2015-12-7 14:36

回复 ych123 的帖子: h  K' u+ g4 J% p
6 {, o# l, ^% o& Y% }
是的,都是用枪吸弃更换新鲜培养基的
作者: ych123    时间: 2015-12-7 22:53

回复 夜光猫 的帖子
' }, M0 F9 U: O1 z( q! t7 m5 M
& ~4 u) [1 Y# Z/ `* K我感觉长了半个月了,那个细胞球没变化啊
作者: 夜光猫    时间: 2015-12-8 13:27

回复 ych123 的帖子9 d8 u$ }9 ]& T  K
+ [7 W  I; `* q# r# d. v2 N
我是诱导了3w,肉眼是没觉得有什么变化,你得做染色鉴定呐
作者: ych123    时间: 2015-12-8 14:08

回复 夜光猫 的帖子* W6 M7 C: V: b5 P/ s  _5 F9 j
0 Q$ x$ o% L  J/ x  o! ?
关键是太小了,石蜡切片好做吗,还有你是做的甲苯胺蓝染色,还是阿利新兰染色啊,求指教
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-15 12:58

你试一下调整细胞悬液浓度为2*10^7/ml,然后用10ul枪头接到孔板中培养,多练习几次总会成功的。
作者: ych123    时间: 2015-12-17 09:53

回复 沙漠狐o0 的帖子- A2 s) \8 A6 X

. ]$ e. [8 h- |! i' B5 ~8 A好的,还有那个甲苯胺蓝染液咋配置的能给我说哈吗,谢谢
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-22 13:10

回复 ych123 的帖子
" D$ e5 |  n% t, i) N9 ?
" r- W7 P, w! N8 g0 s. r, h我没用过这个染液,用的是阿尔新蓝染液。. U0 N1 g0 C: E

作者: ych123    时间: 2015-12-22 15:01

回复 沙漠狐o0 的帖子! k/ N; z" Y$ A% d3 i$ I* b- y
4 Y7 R6 z! d' t0 |8 k
你的阿尔新蓝染液是买的现成的吗
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-23 08:40

回复 ych123 的帖子/ r& D; Q4 M1 {) I# h/ v. b
: H: o4 Z- i, b, a
买的固体,自己配的。
作者: 三月桂花香    时间: 2015-12-24 10:47

马上也要做成软骨诱导了,学习学习~
作者: ych123    时间: 2015-12-24 15:58

回复 三月桂花香 的帖子2 z* ]  A3 P* I, w/ {' q

  V" j. P. _  C6 }# `5 X4 ]2 i1 O共同学习吧,我第一次也没做好,太小了,切片看都看不到
作者: ych123    时间: 2015-12-24 15:59

回复 沙漠狐o0 的帖子
: R* X7 {5 n0 |' |4 U, B& h+ q0 k
% i. Y. |2 {) u3 w1 P4 H哦。好的,自己配感觉总有点不放心
作者: firstaider    时间: 2016-2-3 15:49

回复 ych123 的帖子, ]5 ~# u& P4 u+ F; ^
3 {# v5 ~/ I9 s! d9 ~0 f
是的,换液的时候动作轻柔,就不会飘起来
作者: ych123    时间: 2016-2-22 12:05

回复 firstaider 的帖子1 L: q& F; q( d

  i# _( f- K2 d: C8 K' T) q4 q嗯,好的,谢谢




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