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标题: 间充质干细胞成软骨诱导怎么种板,,,,,, [打印本页]

作者: ych123    时间: 2015-11-21 18:39     标题: 间充质干细胞成软骨诱导怎么种板,,,,,,

各位亲有谁做过成软骨诱导啊,种板的时候应该怎么种?必须得像文献那样离心后不混悬,直接形成微小球种板吗,求高手指导
作者: baby00000003    时间: 2015-11-23 08:36

U底96孔板,2.5*10^5/孔,离心之后稍微吹一下,让细胞团漂得起来但是不散最好~
作者: ych123    时间: 2015-11-23 15:40

回复 baby00000003 的帖子) `3 M- s6 @7 I' \; Q1 j
" ]0 q% W6 {7 S. W# `0 T
好的,谢谢
作者: 夜光猫    时间: 2015-11-23 18:20

我们是直接在15ml 离心管里诱导培养的,离心后加入诱导培养基,第二天就可以看到底部沉淀变成球状了
作者: ych123    时间: 2015-11-23 22:20

回复 夜光猫 的帖子6 \) M& z0 |# V3 C
, e% w8 S; ~2 N
那个小球会漂起来吗?我的好像没有漂呢
作者: 夜光猫    时间: 2015-11-26 16:54

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5 j* U- X$ Q+ x  |" G
0 I! H) `. f1 O1 L% r% O& X8 L换液的时候动作轻柔,就不会飘起来,但是你能看到球状在哪里。它是自然沉底的
作者: ych123    时间: 2015-11-26 22:36

回复 夜光猫 的帖子' m+ K1 Y3 I& V' S9 ?- w
' d, c! R/ t  Y- c; ?
看的到很小的一个,你们每次换液是用枪头把培养基吸出来吗?
作者: 夜光猫    时间: 2015-12-7 14:36

回复 ych123 的帖子- r3 m7 e# l( T1 T& b# c8 _

' T' ^# l* `' M* v# L0 S是的,都是用枪吸弃更换新鲜培养基的
作者: ych123    时间: 2015-12-7 22:53

回复 夜光猫 的帖子. C$ }3 d3 i# d5 L
; b8 h1 t& w, W/ L# ]
我感觉长了半个月了,那个细胞球没变化啊
作者: 夜光猫    时间: 2015-12-8 13:27

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4 E. f, O* ]# u- o1 @$ A/ ]9 O5 [* E! r3 {# m5 ]7 o+ d/ w
我是诱导了3w,肉眼是没觉得有什么变化,你得做染色鉴定呐
作者: ych123    时间: 2015-12-8 14:08

回复 夜光猫 的帖子8 k1 X& {- C( a' |! c! y6 i- z: \

6 J) ?6 w3 ~5 F  A" e关键是太小了,石蜡切片好做吗,还有你是做的甲苯胺蓝染色,还是阿利新兰染色啊,求指教
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-15 12:58

你试一下调整细胞悬液浓度为2*10^7/ml,然后用10ul枪头接到孔板中培养,多练习几次总会成功的。
作者: ych123    时间: 2015-12-17 09:53

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$ [  w% K& c8 `3 t4 s' N8 ~4 S2 m4 ]4 r/ ?
好的,还有那个甲苯胺蓝染液咋配置的能给我说哈吗,谢谢
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-22 13:10

回复 ych123 的帖子* S/ A" }. B  e$ o

1 v. [- v% g  i" Z) R3 ^我没用过这个染液,用的是阿尔新蓝染液。8 w" M, y- O8 x

作者: ych123    时间: 2015-12-22 15:01

回复 沙漠狐o0 的帖子
- H3 L! G: B0 ]! d$ \
0 w- m* D5 ^! q6 W8 c( N你的阿尔新蓝染液是买的现成的吗
作者: 沙漠狐o0    时间: 2015-12-23 08:40

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. I4 P. T# e% U( ^: x, p" g2 t" o
) N4 d- _; R1 S买的固体,自己配的。
作者: 三月桂花香    时间: 2015-12-24 10:47

马上也要做成软骨诱导了,学习学习~
作者: ych123    时间: 2015-12-24 15:58

回复 三月桂花香 的帖子
4 H% O" |) d7 [# o
+ b5 B6 ]& G  e! a共同学习吧,我第一次也没做好,太小了,切片看都看不到
作者: ych123    时间: 2015-12-24 15:59

回复 沙漠狐o0 的帖子( q( j, L$ r0 t  U' k
: o8 |$ G4 J! k2 O
哦。好的,自己配感觉总有点不放心
作者: firstaider    时间: 2016-2-3 15:49

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' n) G' F- s; z
9 Q& ]# Y. Z8 s, c$ u; `/ |是的,换液的时候动作轻柔,就不会飘起来
作者: ych123    时间: 2016-2-22 12:05

回复 firstaider 的帖子
6 |6 z/ W# H4 N7 G9 F5 N4 P0 F1 J: f% X0 H
嗯,好的,谢谢




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