跑胶出现三条带？

nichifanlema2

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中间的是引物二聚体，因为在50左右，你的引物大概是20-30bp吧，最小面的应该是你的引物单链，说明你PCR的时候引物浓度太大，导致引物染色和二聚体特别明显。建议降低PCR时引物浓度。
$ n/ b7 ~0 U6 \+ Q4 Wmarker还是挺不错的，是哪个品牌的？

nichifanlema2

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; z0 K% P3 Z; x' T0 H引物二聚体的出现不一定会出现在每次扩增和其它基因的扩增中，其跟引物的设计有关。个人认为，在基因扩增时，引物的都是过量的，如果两对引物直接有4个（含）以上的碱基配对，引物二聚体就常常会出现，在不影响基因扩增和表达趋势的情况下，可以忽略不计。通常使用时的引物浓度为10uM,如果引物二聚体较为明显，或者影响了扩增，可以适当降低引物浓度。另外，为了提高扩增效率和扩增时的特异性，可以提高退火温度。