跑胶出现三条带？

云飘过的思念

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, n" q/ ^5 ^3 a, h7 A/ {  ^8 n! B条带的问题相信楼上的各位老师已经帮您分析得很清楚了，我不再多说，对于胶染法个人认为不需要像这样过曝光，这样的话会提升了背景值，若染料为EB的话会发现在紫外下仍有染料的部分呈现粉红色，反观整体胶的轮廓不难发现下沿的轮廓不清晰，这样的曝光强度会对某些成像分析定量有影响，建议楼主能够看清条带及非特异情况和二聚体的强度为准尽量的降低背景值的干扰，依靠分析软件标定的定量条带亮度对样品浓度进行定量分析。' J4 j6 X1 ]: p" o
略有拙见，各位勿喷啊

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  G! X0 U# z- z/ I7 J# |4 v, R回复 gxbzjznn 的帖子
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9 o& S- l: J0 b7 }/ H; h9 n恩，具体染料可以分很多种，只要能在特定波长激发光下发光即可，但是染色方法是胶染哈，嘿嘿

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gxbzjznn 发表于 2016-1-13 22:38 3 r& g) o, I. q: S! V( w. B
回复 nichifanlema2 的帖子2 _) X; Y/ B5 P& r1 o
, m9 ~- l- n) V& h+ d5 L/ S( D, z
我是按照引物合成回来以后引物管上标注的体积加对应的TE buffer溶解以后再用水 ...

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我们之前溶解引物的方法如下，仅供参考. l- `$ T' E- l: `& y0 D4 E' H: ^
实测浓度（ng/ul）=实测260值*33*稀释倍数/ o( H4 b1 H4 w+ S5 o5 U
实际浓度（uM）= 实测浓度（ng/ul）*1000/M.W* U. A) z% q) H, L3 e
补水量（ul）= 实际浓度（uM）*（总体积-测OD消耗体积）/定溶浓度（uM）- （总体积-测OD消耗体积）3 E( Q( e5 R9 D: m+ j/ H
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定量设备为NanoDorp2000