细胞倍增曲线的制作方法及原理

Tracy-Cui

1 细胞计数法：A）取生长状态良好的细胞，悬浮的细胞直接计数传代；贴壁的细胞采用一般传代方法进行消化，制成细胞悬液，计数传代；。记录下接种细胞的量。如果是贴壁培养的细胞建议多接种接种孔板。 B) 计数。每隔12h或一天（根据具体的细胞种类）进行计数。培养3～5d（根据具体细胞）要给未计数的细胞换液。  C） 以培养时间为横轴，细胞数为纵轴（对数），描绘在半对数座标纸上，连接成曲线后即成该细胞的生长曲线。
* k! |2 P! E- U& g2.MTT法：A) 接种细胞，培养细胞。细胞接种于孔板中。注意接种于孔板中细胞的量要一致。 B) 呈色：每孔加入MTT溶液，37℃孵箱中继续孵育，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。对于悬浮生长的细胞，需离心（1000rpm，5min），然后弃去孔内培养液。每孔加入DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解。C）比色：选择490nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。以时间为横轴，光吸收值为终轴绘制细胞生长曲线。