请教各位老师有关collagenase

baby00000003

请教各位老师，
3 m7 b$ a' s* L, w$ M如果用于组织消化，含有collagenase的缓冲液需要特别加入Ca2+么？
8 N  C3 j2 P( o5 R5 p% D比如，sigma网站上的trouble shooting说，5mM的Ca2+是这种酶活性最好的离子环境，: ^4 v& g4 ?1 |
但一般用于冲洗、缓冲的缓冲液都是不含Ca2+的，5 A) T8 A- e# o& Y( ^5 f
是否先用无Ca2+的缓冲液洗涤，再用特别添加Ca2+的缓冲液配collagenase消化效果是最好的呢？

nichifanlema2

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消化多能干细胞的话，collagenase可以用基础培养基配制，如DMEM等。配好后分装冻存在-20度。
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ytumuyangren

回复 baby00000003 的帖子; h, I8 }0 \& F6 x6 C4 i$ g/ m

* s, V( l/ i2 |# g+ B! Y不用那么麻烦啦，消化下来的细胞用什么样的培养基培养就用什么样的培养基溶解collagenase，如楼上所述配好分装后直接冻存-20度，但是切记配好后的collagenase是储存浓度哦！