请教各位老师有关collagenase

baby00000003

请教各位老师，* K8 _' R# J& @
如果用于组织消化，含有collagenase的缓冲液需要特别加入Ca2+么？  v: k! j5 u% {* I  v& y: ^5 F2 w
比如，sigma网站上的trouble shooting说，5mM的Ca2+是这种酶活性最好的离子环境，
6 ^2 z: i) A6 O$ A但一般用于冲洗、缓冲的缓冲液都是不含Ca2+的，
* E6 |1 Q4 L: L& y8 u1 J是否先用无Ca2+的缓冲液洗涤，再用特别添加Ca2+的缓冲液配collagenase消化效果是最好的呢？

nichifanlema2

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; a$ u: E3 W8 ]4 E1 a9 G消化多能干细胞的话，collagenase可以用基础培养基配制，如DMEM等。配好后分装冻存在-20度。$ l/ x! r$ o' M' _# T, [0 q9 ?

ytumuyangren

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不用那么麻烦啦，消化下来的细胞用什么样的培养基培养就用什么样的培养基溶解collagenase，如楼上所述配好分装后直接冻存-20度，但是切记配好后的collagenase是储存浓度哦！