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楼主

发表于 2016-3-3 16:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请问胰酶消化时间微长，传代培养后感觉细胞形态不饱满，还能恢复过来吗方法？

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沙发

发表于 2016-3-3 16:57 |只看该作者

回复 1195963542 的帖子: o; S* ]' C# F' h4 h; x

个人感觉这取决于细胞类型，原代细胞消化过度估计会影响较大，细胞系比较小。培养一段时间看看，若损伤太大，只好舍弃了。总体来说，胰酶活性比较强，务必掌握好时间。楼主可以试试gibico的TrypLE，消化温和一点

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藤椅

发表于 2016-3-3 17:31 |只看该作者

消化过度的程度很关键，如果是稍微过一点，加大胎牛血清用量即可，从流式细胞仪检查和镜检来看恢复的很好，如果消化实在过头的话还是重新培养吧！

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板凳

发表于 2016-3-23 16:36 |只看该作者

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消化的太过，关键还要看细胞死亡了没？加大血清浓度，如果还能继续贴壁生长，一般变异分化的可能性不大，培养1-2代后，能恢复过来，条件许可，可以再做个鉴定，比如流式，免疫组化等

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报纸

发表于 2016-10-26 16:47 |只看该作者

微长不用担心啊，我就经常消化过头了，一次消化5-6瓶，不可避免就有的消化过头了，前期可能状态差点，后面长满了也就一样了

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地板

发表于 2016-10-31 16:09 |只看该作者

胰酶消化过程是关键，建议先加少一点，逐步再添加到能消化下来。

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7楼

发表于 2016-11-1 08:16 |只看该作者

基本2分钟左右就可以了，时间过长，细胞容易死亡~~~

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