内毒素检测时机

醉心科研

讨论一个问题，收获过程中大家都是哪一步取样检测内毒素的呢？& r2 g" U2 q" L5 {) Y
1）培养液取样 2）生理盐水清洗中取样 3）终产品
0 u* j! T; v1 l( q+ t! \* X& ~( q2 T1 R) B' h3 X3 _  v) o& g! l
如果是2和3，那么问题来了，经过多步清洗弃上清，内毒素还在吗？" u! m* i2 l$ S# s5 g
请大家各抒己见，并盼高人解答。

zmfang555

培养液和终产品需要检测,内毒素能附着在培养器皿和细胞上,而且附着能力非常强,不是稀释和洗涤就能去除的.

醉心科研

回复 zmfang555 的帖子
% m! m9 c! ~; J7 X5 p
7 x/ p$ z- B5 Q4 y  o附着在培养器皿上倒没事，反正细胞是要拿出来的。
7 S0 g: Q: a  \% O- \. P至于附着在细胞上，那就是说还是有另外没有附着的被洗掉了，那测终产品还准确吗？
! y3 O9 j8 o6 S) i7 G; |& F; J  p# O- G, [5 G4 d2 @- [: W% c1 C: V
测培养液的话，已明确培养液及因子本身会造成假阳性怎么办？7 R( k( B) b+ Z  t% ?4 R, G

" s2 M+ {: N/ E6 w- a8 N2 A其实说真的，如果终产品内毒素高到能测出来了，估计袋子里已经染得一塌糊涂了。

aochongyu

我们都是检测终产品，也可以再做革兰氏染色啊

醉心科研

回复 aochongyu 的帖子
0 ~4 r2 z% w2 E3 N( V4 @' W* a" \. M) d% k; O
我主要想知道，终产品经过几步盐水清洗了，即使培养中真有细菌内毒素产生，已经洗掉了大半吧？检测终产品能做到控制培养过程吗，感觉只控制了收集过程中用到的耗材有无内毒素？

娟姐姐

清洗第一次进留样检测内毒素

我是传奇

终产品必须检测。其他环节根据自己实验室需要酌情考虑。一般只要是超标不是洗能解决的吧。

xld1984

各个检测阶段，内毒素合理范围是多少呀？

小刘

用1最好，小于等于0.5EU每毫升

momoenn

回复 醉心科研 的帖子
0 d1 d( h2 z: |+ m( f5 D4 B# w
1.内毒素是格莱氏阴性菌死后分泌的，一般细胞如果菌检没有问题的话，内毒素检测也不会有问题。/ y9 z) v0 V( i8 t
2.至于你说的已明确培养液及因子本身会造成假阳性怎么办？我想问得是，你明确了吗？鲎试剂与内毒素的凝胶反应应该是特异性的，鲎试剂就是专用于内毒素检测的，基本上不会与其他物质发生反应啊，如果培养基和因子合格的话，假阳性的几率几乎没有。如果结果阳性，有几种可能：a.培养体系被污染了；b.选的培养液或者因子，也就是培养体系本身有问题。这个你可以通过采购的试剂到货后先抽检保证合格以后再使用；c.检测内毒素的物料耗材有问题，内毒素检测最好使用内毒素检测专用的，而且一定要保证在保质期内。过了保质期，玻璃容器应进行干热灭菌。