内毒素检测时机

醉心科研

讨论一个问题，收获过程中大家都是哪一步取样检测内毒素的呢？
5 V: H; Q3 g# r6 n# P1）培养液取样 2）生理盐水清洗中取样 3）终产品
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如果是2和3，那么问题来了，经过多步清洗弃上清，内毒素还在吗？. M9 u7 N( O2 |' E
请大家各抒己见，并盼高人解答。

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回复 zmfang555 的帖子1 y$ Z6 v$ r$ {3 T' X! g% `  [

: s9 C: h1 z% r+ I& e附着在培养器皿上倒没事，反正细胞是要拿出来的。
2 L' C: V# y; R# z, c* }至于附着在细胞上，那就是说还是有另外没有附着的被洗掉了，那测终产品还准确吗？
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. j* }! S, U" n* q' V$ L/ K4 }: S测培养液的话，已明确培养液及因子本身会造成假阳性怎么办？" u, A3 \+ l, I" q. s" |+ G3 A( E

! [# X7 X5 Z8 h* |" L( H. o其实说真的，如果终产品内毒素高到能测出来了，估计袋子里已经染得一塌糊涂了。

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回复 aochongyu 的帖子
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我主要想知道，终产品经过几步盐水清洗了，即使培养中真有细菌内毒素产生，已经洗掉了大半吧？检测终产品能做到控制培养过程吗，感觉只控制了收集过程中用到的耗材有无内毒素？

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回复 riverhe_87 的帖子) }0 d6 X5 ?' ~) f3 ?" q7 R
! C" W5 D: H# M: k/ {
检重悬后的细胞液，是不是大量内毒素已经被洗掉了（假如有的话）？- l) ]5 R, \& G
内毒素是水溶性的嘛。# q4 r) F2 _% t+ O* x
这样的结果还能反应出培养过程是否内毒素合格吗？  H0 p7 {# x& y$ \$ `5 Q
就是说，很可能培养结束时培养液内毒素不合格，洗两遍就合格了。同时培养过程中的菌培养结果又为阴性。这种怎么办呢？

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回复 momoenn 的帖子( v$ d9 p1 C1 ^4 n+ h0 v; M

' l* M: _1 i* a7 p9 R/ k不知道你们有没有遇到过这种情况，洗两遍重悬细胞液内毒素合格，同时培养过程中的菌培养结果又为阴性，镜检也没问题，但培养结束时培养液内毒素不合格。这有可能是怎么造成的，又该怎么处理呢？

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回复 riverhe_87 的帖子0 I- t2 E# F% m

$ q) h6 Y8 X, C2 o有种豁然开朗的感觉，谢谢！
8 U) @' @' C2 G1 h我之前可能对内毒素检测的目的有误解。总认为，如果培养过程染过菌，通过盐水洗涤会大量稀释内毒素导致合格，但细菌并不会通过洗涤去除，所以对终产品来说还是有风险的。! K9 d7 B" e9 z- E& D6 _! D. B
你现在说内毒素检测目的是保证回输品无热源，就好理解了。监控培养过程是否染菌本来也不是内毒素检测的任务，所以才有菌检。+ I5 |' J9 I5 q1 G* N! P0 ^: B/ [
内毒素检测和菌检相辅相成，但不能互相替代。/ N" w- H( {- T
多亏了这次讨论。

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回复 momoenn 的帖子
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是除过热源的容器取样，取样用的注射器。我相信不是检测过程造成的假阳性。

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回复 momoenn 的帖子
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8 n% z8 c  @+ V; R你说得对，确实是培养基的问题，培养基的内毒素标准低于生理盐水，所以会出现阳性。
2 |' s3 e+ Y- C+ L倒不是抗生素的问题，免疫细胞培养本来就不应该加抗生素，残留还是次要的，关键是有染菌问题的话难以发现。

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回复 momoenn 的帖子$ V2 g0 E+ q% I9 [

( ?7 O# Q2 O. X5 k! c0 [- L' l, @我们按注射用水走，0.25EU。