脐带间充质干细胞培养讨论

cruilife__wen

你好！
' C' f1 t% B! K. c% J1、一般我们都会清洗未剪碎前的组织，因为清洗的目的是表面消毒，这样做剪碎后的黏液相对多一些；而剪碎后清洗我没有做过，对晾干处理的时间会较长。* o+ ?; E) G' L7 l8 f, i/ K
2、组织贴壁后爬出效果可能跟样本质量，大小，厚度，形状，等因素都有关，所以未必每个视野都有。当然我们也遇到过每个视野都有爬出的。: N0 }  z. b" ^" [0 q+ E
3、组织贴壁较常规，因为操作相对简单，保持操作一致性。而消化法较少用到，因为消化时间长，而且接触面不充分等问题尤其突出，而且消化出来的细胞质量难以保证。
/ @. v# _# ?6 A; b, ^) Y# s& ~7 k4、我用是DMEM/F12+FBS，感觉效果不错。
( y# f( f+ P9 u1 f7 @9 D* J6 p: |! ]
- D) v3 \' n; {Q1：有没有对比过组织剪碎后清洗与不清洗的贴壁效果有多大的差异？

cruilife__wen

回复 444352110@qq 的帖子: [, ~) v3 e. a) E- v7 u( l, @

+ E& K; ~! x* V3 [( \& i其实晾干就是让组织块放置于培养平面，让组织表面上的液体蒸发，因为组织上有较多黏度较大的液体，所以比较快干，晾干就是为了固定组织，让它在更稳定的环境下爬出，以及形成生长晕、形成细胞集落。一般靠经验目测组织的晾干程度，经验值40min左右。等它干了就可以沿壁缓慢加培养基，放置CO2培养箱里培养。6 b3 ]1 {2 u8 F7 C
而贴壁效果有很多影响因素，处理时的操作、组织的质量、培养基成分等。其中也有很多我不了解的东西，我也在摸索中。