贴壁细胞传代用胰酶消化好，还是用细胞刮直接刮好？

lijie_suc

最近听说好多实验室在处理贴壁细胞时都用细胞刮进行传代和细胞收集，自己没用过。之前觉得胰酶消化还好，最近实验进展不顺利，正好听其他同学说使用细胞刮会对细胞的伤害小很多。不知道是不是真的。求各位大神指教。如果使用细胞刮，哪个公司的会好点，使用时又有什么注意事项。求指教！！！

Diane0321

我们实验室对不同的细胞有不同的消化方式，贴壁细胞也有多种，应该区别对待吧，而且，我个人觉得胰酶对细胞的伤害确实挺大的

hyde

一般细胞系都是驯化下来的，所以传代方式不会对细胞造成太大的影响，每次传代那些耐受这种传代方式的细胞会活下来的。你可以稍微减少消化的时间或者减少吹打的次数

lgfffancy

我个人认为 还是胰酶消化好7 k! Y. \7 V( y& i2 z) R( J
因为你刮下来的细胞 很难吹打成单细胞悬液 + m1 ^: P2 [9 v
十分不利于细胞之后的传代
( Q0 u* i  o1 b8 p5 y$ f自然也不会利于之后的生长
6 L8 u3 e  j! J# ^* w$ ]1 R如果你能刮下来 把细胞吹打成单细胞悬液
$ J! @; }) u! W1 Z4 R3 s; W4 a那么 我推荐你用细胞刮

fenlichong

之前用细胞刮刮成纤维细胞，结果可能力度太大有的都飘起来死了，但胰酶消化的没出现过问题。建议楼主自己都尝试下，找到合适的方法。

baby00000003

用酶消的话对细胞损伤更小吧，特别是trypLE那样的温和胰酶* X- i  W3 `/ C% n# ]
舍得花银子的话就用温敏变性材料的平皿，不过估计细胞掉下来的时候是成片的，想获得单细胞不容易

yeshch

我们实验室已经没人用细胞刮了，整体来讲还是酶消化传代比较好。楼主说的贴壁细胞是指哪些细胞，不一样的细胞采用消化方法也不一样的：human ES一般用胶原酶比较好，时间紧急也会用到EDTA传代；Mouse ES一般都是用的胰酶消化，可以根据自己情况采用原液或者稀释一定倍数；当想单细胞传代时一般采用胰酶消化，如果担心对细胞损伤大，可以选用胰酶替代物Tryple.最后，楼主利用酶消化传代不好有可能跟终止不当有关。祝实验顺利哈！

smile微微笑笑

推荐个胰酶替代物，invitrogen的Tryple express 相对温和

Natalie

我们贴壁细胞一般使用胰酶消化，如果是悬浮细胞，它贴壁了，只能使用细胞刮板了
  h1 d3 b4 h. c4 X/ v

zuming

酶消化的对细胞造成的损伤更小点，条件也更容易控制，一般来说多摸索几次就能找到很合适的消化条件。但是用刮刀就不好控制了，会造成大量细胞破损，内容物释放到培养基，这种情况产生的试验结果很难说完全准确。