293T和platE细胞培养基中加入NEAA会有什么影响？

芦苇浅

以前我们实验室养的platE细胞直接用高糖DMEM和10%FBS培养，后来我看有的protocol里边添加了NEAA，所以我就在medium中加入了NEAA，但是最近明显细胞生长速度变慢，细胞都长成了colony样子，一团一团的，有时候细胞还会叠加生长。请问各位觉得是不是NEAA的问题呢？原因又是什么呢？谢谢

gxbzjznn

应该不是

芦苇浅

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7 R3 @2 q9 B4 W6 X7 s/ J
, p6 {  [3 q+ l- G6 E3 R0 L那您觉得问题出在哪？

wuhuaguo88l

  S. D: t' R# x

3 j- ]: P% q( [* X5 n( K可能是NEAA的原因，做一个对照就行了，同一批细胞一组加NEAA，另一组不加，先把这个可能的原因搞清楚。若是NEAA原因，再分析NEAA购买来源是否正规，储存是否适当，NEAA是否无菌，内毒素是否超标等等，本人只是抛砖引玉，具体原因可能还要你自己分析。

张月儿

赞成楼上。设个对照，立马就能搞清楚。另外，虽然没有具体查过什么原因，但我们实验室培养时是不加NEAA的，长得挺好的。

watchen198891

回复 芦苇浅 的帖子( u! P  n( O5 g! s* N! Y" C

6 P/ p4 ?" @4 N) o4 h应该不是这个问题，一般加入适量的NEAA对细胞生长还是有一定帮助的，你配置培养基再加入NEAA时，培养基的颜色有什么变化没有？

gxbzjznn

一般NEAA不会出现什么问题的 除非污染  楼上两位说的那个设置对照试验的办法本人认为可行性以及可靠性不大 建议你用排除法  先排除几个加量比较多的试剂是否有问题

芦苇浅

回复 watchen198891 的帖子) x8 D  M) ~$ b* ]  w. D
- _/ H7 i/ s5 G) {) E
一般新配置的培养基，加入NEAA后颜色会变的更黄，我觉得这主要跟ph有关，medium放置时间长了就又恢复红色了。

watchen198891

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" a+ d7 e$ b6 O9 S! h
, N- ^; Z5 n, o1 R. g) t8 fpH值得变化会影响液体里面一些营养成分的活性，特别是少量配置培养基时更应该注意配液时pH值大幅度变化，一般加入NEAA时是缓慢加入并且振荡，使整个体系尽快稳定pH值不能大幅度变化。

splinkerette

期待楼主的对照实验。。。NEAA真能有这个作用？应该不会把