单个核细胞存储相关问题

iytbxxg

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% r, m: S! t' C+ \9 H1 {) v* C9 n# Z9 }8 {
非常感谢！其他的方法没有了是吗？75%的活率太低了是吧，一般的复苏活率多少是正常的呢

sithbj

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7 z6 O: c" E' m! X$ I1 z2 H' ?0 ]6 w0 [( J( ~+ N! V/ X1 m/ R
要加血清、血浆或者白蛋白。20%到50%吧。只有普通培养基不太好

18560211236

复苏后在培养比直接使用效果好，从数量跟活性上说

iytbxxg

三周前冻存的pbmc,复苏后活率才75%！咋这么低！？有大神们给找下原因吗？用完全培养基加dmso，9：1，其他什么都没加。

abc2613130

一般冻存都是血清或者人血白蛋白：DMSO为9:1，复苏后需要加IL-2刺激生长，你说加其他因子刺激才能使用，那得看你需要用什么类型的细胞在决定你加什么因子。

LVXUEYAN1101

  t. E7 D& f4 K  \4 X1 a1 W

% h5 x4 u7 m8 j( J4 [0 }; L) J% |& I用于科研的话冻存液FBS：DMSO=9:1就可以了，复苏后细胞因子刺激培养；用于临床的话就得用CTS级别的冻存液了，复苏后细胞因子刺激培养

鸵鸵

回复 645149980 的帖子( j: p) g, Z. v9 ~* }' V

; j% c' a8 k4 o5 i# A) I& Y- ^哦哦，你这个CIK是单纯的用于科研还是用于治疗啊

645149980

' _- \, C3 i! u9 x+ z

$ b6 x, O# Q5 o我试过FBS:DMSO=9:1，冻CIK，也试过培养基：FBS:DMSO=7:2:1冻，还有DMSO加人血白蛋白冻，复苏后细胞都长得挺好的，就是多少还是有一些影响，还是有部分细胞死亡。复苏用的是原来培养CIK细胞一样的培养基，加入了相应的IL-2。

yingfeixiang

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$ J; J( i+ P3 K8 B: `  i  t7 j
* w4 k6 B8 Y( B" e* h( b* E) @肯定是自体呀，什么也不如自己的不是。

gondobar

回复 鸵鸵 的帖子0 \5 s; P+ z$ F' Z. S

: ?$ G# D: y  q2 w和你冻存时间有关，冻存PBMC，当然加各种刺激因子。冻存刺激过的细胞，单纯增值就行。冻存最终制剂，复苏保证活率和阳性率就行。