关于间充质干细胞培养时使用的fbs的问题

eric1993

我们实验室使用FBS培养脐带间充质干细胞，可是灭活后的FBS中的沉淀一直都离心不下去，会悬浮在离心管中间，目前使用的是3500转（2465N，离心机上线为5000转），30min，升降速为500（离心机上线为600），请问大神们有没有什么解决的办法啊，谢谢

yingfeixiang

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0 d5 ~5 Z) M9 S' P. h5 t6 f2 x0 q. b  ^) f3 i9 o6 S6 W
不是，这个需要灭活吗？

eric1993

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8 S7 l5 a  E5 I& A: j# w0 _* L我看有的文献上说国外进口的高质量FBS不需要灭活，但是国产的大多数还是建议灭活后使用的，但是灭活后其中的沉淀却无法离心下去，目前也找不到别的方法去除沉淀

yingfeixiang

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9 G/ `; \# K% p6 B& ^! Y) o1 ]; T
6 @, }0 {. ?/ N4 s, \啊，国产的需要呀。我以前离心去除沉淀很好去呀，2000rpm可以了，没看到你这个问题，在中间的是丝状悬浮物吧，可以使用前有0.22um针式滤器过滤。

eric1993

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" w! h) l- R/ R8 A, T- `' o5 ]
, i+ x- g  y7 D6 p0 U我用3500都不行，而且中间的不是丝状的，考虑过用过滤的方法，但是FBS里的蛋白会堵塞滤膜，有可能是实验室的离心机的原因吧。。。

Dunncao

弱弱地说，离心不是计转速而是离心力啊。。。1 N7 @9 y2 ~) |- |
中学物理，离心力跟旋转半径成正比，相同转速下，转子越大离心力越大啊。所以如果离心机太小，5000转也不管用啊。' [; R3 ~# O0 Q/ `5 g5 j

eric1993

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6 g2 v0 F: z! |9 [9 P; Q. S9 ?  b6 K" c# b5 y
实验室用的是安亭TDL-5C的离心机

Dunncao

回复 eric1993 的帖子6 U' E9 u: p1 A4 x, x
) ?) @: u8 w6 l0 ?& k* e& U2 \
用的是多大的转子呢？找到转子数据，或者动手量一下转子半径，算一下就知道是多大离心力了呀。我用的16cm的转子，也要上到3000转以上才能离下来呢。

eric1993

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: F  q; R8 C) g7 L4 I  B. c- N
' J% b2 K6 F& }1 \  J) {# N离心力是有2460N

Dunncao

回复 eric1993 的帖子2 b% \! f- C0 _+ X
, G# O1 C6 n3 s! E9 _
那就是只有246G呗，显然太小了呀。