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[讨论] 台盼蓝能裂解细胞吗?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-7-27 15:54 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在用台盼蓝计数时,发现细胞加上台盼蓝后,就产生很多兰色的碎片,不加台盼蓝就没有细胞碎片。是不是台盼蓝能裂解细胞呢?或者能裂解受损伤的和死的细胞?
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2016-7-27 17:48 |只看该作者
不加台盼蓝你怎么知道没有细胞碎片?
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藤椅
发表于 2016-7-28 09:50 |只看该作者
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。9 j5 b" l8 \6 @
  这是台盼蓝计细胞的基本原理,按这个来说应该是不会裂解细胞的,而且如果要裂解,怎么会广泛的拿台盼蓝来计数呢?
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板凳
发表于 2016-7-28 11:15 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
应该不会,活细胞细胞膜具有选择透过性,台盼蓝不会进入胞内,你看见的碎片可能是死细胞自身裂解造成的吧,我也是猜测。
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报纸
发表于 2016-8-1 10:23 |只看该作者
据我的经验,加入台盼蓝静置后,活细胞在镜下是白亮的,死细胞或状态不佳的会染成深蓝或浅蓝色,细胞碎片也会被染成蓝色;但不加台盼蓝,镜下可以看到细胞,但看不清细胞碎片。楼主可否发照片对比下?台盼蓝应该不具裂解功能,细胞被台盼蓝染色一段时间后再观察形态仍是完整的。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

地板
发表于 2016-8-1 10:54 |只看该作者
那是台盼蓝里面的渣渣,离心以后取上清用就好啦~
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金话筒 优秀会员 小小研究员

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发表于 2016-8-1 11:15 |只看该作者
胎盘蓝是不会裂解细胞的   不知道你用的是什么牌子的   一般胎盘蓝在使用的时候都需要用滤网过滤   而且用的时候不要激烈的摇动  防止把底部的一些沉淀摇上来   所以计数的时候才会出现你说的小点     如果你用的是细胞计数仪    是可以人工去除的    呵呵    不过不建议使用
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发表于 2016-8-2 09:06 |只看该作者
短时间内台盘蓝对细胞活性是没有影响的,应该不会裂解细胞。很有可能是台盼蓝本身的沉淀或者杂质,以前我也遇到过,只需要把台盼蓝过滤下再用就好啦
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发表于 2016-8-30 09:41 |只看该作者
不会,但台盼兰对细胞是有毒性的,所以计数时要快,否则误差会很大
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发表于 2016-9-1 13:42 |只看该作者
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性, 通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。这被称为染料排除测试。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞,并可使用细胞计数器进行计数。借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。所以台盼蓝应该不能裂解细胞
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