细胞计数问题

xieyun20052005

计数之前要混匀，取样非常关键，个人觉的人工计数就是比较费劲，而且计数一般会比计数仪低一些，要是做系统实验要不就一只人工计数，要不就计数仪计数，只是不同的人计出来的数相差很大，所以要最好是一个人计数

晗晗

如果你是新手的话可以用计数仪计数，可以多计几次看一下重复性。如果人工计数，也要多重复几次，要不然会有偶然性，还有就是无论怎样计数都要把细胞混匀，如果几次计数结果相差大的话一定要重新计数，多练几次就好了，还有一种可能就是人工计数的时候查数查的不对，没遵循计数原则导致两个结果相差得多

吃呆猫

我们这边一般都是数细胞，不用计数器，计数器第一，使用的计数板一般不可重复利用，浪费大，第二假阳性多。自己数简单一点，需要的时间长一点，数的不稳定的原因是你没数够，数多了自然就准了，数细胞是要练的

niliu730323143

详细操作，以T25为例，消化离心后，一般加3-4ml培养基重悬吹打均匀，然后吸50ul，加入450ul培养基混匀稀释，计数时，每个16格以20-50个为宜，这个范围是最准的，建议数三次，如果两次之间的相差不超过20，亦可以。平均数除以4，再乘以10^5 ，这就是细胞密度。

风倾颜

计数前一定要将细胞吹散混匀，计数不稳定有差异是正常的，但是如果相差较大可能就是计数过程中有问题了，可以多计几次数，取平均值。细胞计数多练练就好了5 A6 c1 [" [. s  r

sfnana

计数最关键的步骤就是吹散、混匀细胞。对于计数板和计数仪来说，原理都是一样的，如果技术熟练的，计数板可能会更快，更准。对于计数仪来说，更多的是便捷，不用你再镜下一个一个的数，同时还能直接给你计算出想要的结果，一目了然，方便。计数是细胞培养中需要掌握的基本技能，无论是否拥有计数仪，计数板的使用和操作都要掌握，而这个技能的掌握别无它法，唯有多加练习。练得多了，准确性也就提高了。

lihaifeng

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) K; `: b' X7 t* D9 x  E手动计数比较准确，计数前一定要混匀，用进口的计数板更准确。

zhenghua20

计数前必须混匀，如果不熟练的话人工计数可重复性相对较差，熟练了后重复计数相差不多。不是很熟练的话建议使用计数仪计数，可以用计数仪多计几次看一下重复性。其实不管人工计数还是计数仪计数熟练很重要，平时多练多用多比较。

bubble_w

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计数仪和人工计数的原理基本一致，但是有差别基本就在于混匀之后将细胞悬液加入计数板的时候会有差异，比如重悬细胞2min之后细胞沉降了再次人工计数肯定就会和计数仪有差异。而且计数仪会分析细胞的死活，可能计了活细胞的数。我们实验室的计数仪就是显示活细胞数以及细胞活率两个数值。个人认为，只要不差出一个数量级还是可以接受的。如果个别精细的实验，请计数仪的技术支持来维护一下仪器也是可以的。

chrcs

计数前一定要先将样本混匀，若是样本放置过久需重新吹打混匀，多多练习