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标题: 免疫细胞体外培养生长特性 [打印本页]

作者: ltickp 时间: 2016-11-3 13:09 标题: 免疫细胞体外培养生长特性

分离外周血PBMC后，体外活化培养扩增培养中免疫细胞特性，如何判断细胞生长速度达到最快

作者: baby00000003 时间: 2016-11-3 14:00

这只是我瞎猜的，hoechst或者DAPI染一下核，然后流式看看荧光强度，可以反应DNA的复制活跃程度吧，然后就推算出细胞分裂速度的变化趋势

作者: UlissesJR 时间: 2016-11-3 15:06

测一个生长曲线

作者: woshibotao_01 时间: 2016-11-3 15:08

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一般使用血细胞计数仪，先吹散细胞团再计数，根据生长曲线判断
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另外也可以做流式，测细胞周期，总之都要吹散

作者: honey棉花 时间: 2016-11-3 16:29

用CFDA-SE染色细胞，流式检测荧光强度。或者用CCK8染色，用酶标仪检测，可以观察整个培养周期

作者: niliu730323143 时间: 2016-11-3 16:56

种96孔板，每孔细胞数相同，可以添加复孔。不同时间进行CCK8染色，用酶标仪检测，做个标准生长曲线，应该是最简便的方法了吧。

作者: stella2015 时间: 2016-11-7 09:20

通过最简单的方法吧，看你的图片，可以算是镜检的结果吗？T细胞的生长状态并不是很好，第一、二张图片显示细胞碎片很多，你要是细胞染色的活率应该不是很高吧，细胞边缘不饱满，折光率不高，说明细胞大多处在凋亡期，如果不及时处理，可能很难长起来。第三张图片细胞大片聚集成团成云雾状，不透光无折射率，应该是大片死亡的细胞聚集而成，细胞状态非常不好的说，能不能长起来很难说~~

作者: ltickp 时间: 2016-11-7 12:01

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转袋后长得非常快，900ml培养液颜色2天就很黄了

作者: nailute1985 时间: 2016-11-7 12:16

回复 stella2015 的帖子) g W0 H" u7 J" D7 o5 s& H4 o. |
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哥，明显这三张图细胞状态非常之好，活化的T细胞增殖初期就是大片的细胞团，死细胞团不是这样的

作者: stella2015 时间: 2016-11-7 12:51

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抱歉我是以一般转染完慢病毒的T细胞状态好坏作为判断经验，如果是转染完的细胞状态是这样，转染结果多半不会太好~

作者: nailute1985 时间: 2016-11-8 09:53

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转染完的T细胞初期不会成细胞团，大概增殖高峰在转染完的3-4天左右

作者: 淘知路遥 时间: 2016-11-8 15:11

这三图符合免疫细胞生长趋势，培养的很好。可以推测：图一细胞单个分散，应该是培养的第1、2天；图二开始少量聚团，是3、4天；图三细胞抱团大而多，处于生长快速期，培养基消耗快。

作者: 地球外世界 时间: 2016-11-13 12:26

回复 ltickp 的帖子3 d/ { E5 q4 m$ l+ y

培养工艺是否可以传授一些？

作者: moluxingke 时间: 2016-11-14 09:32

三张图片分别是什么时候的啊，这个应该说清楚，没有给出时间的话不好说，但一般来讲，第一二张图不好下结论，但是第三张成团的照片一般是细胞增殖较快的状态下形成的。

作者: xieyun20052005 时间: 2016-11-27 11:33

二三张图看着细胞状态都不错，二是倍镜，三是四倍镜，看着细胞透亮，克隆或者散在细胞较多，没明显死细胞，就说明细胞状态不错

作者: weaponboy 时间: 2016-11-28 21:04

本帖最后由 weaponboy 于 2016-11-28 21:04 编辑

搬凳子学习😊

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