崩溃，茜素红染色又没有染出来

城墨

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第三次染色了，每次成骨诱导都是大半个月时间
8 j% Z' L2 M3 w& `$ M$ j+ n今天是第三次染色，依旧什么都没有
4 P3 m2 J+ k1 ^3 E我的做法是，MC3T3-E1细胞，在VC和甘油磷酸盐的成骨诱导下14天。& W. v7 X" A5 n3 C8 L
做AR染色，先PBS洗细胞，再95%乙醇固定10min，再蒸馏水洗三遍，最后茜素红溶液染色。- l7 r9 A8 e, ^' `# B
问题是茜素红我已经用过很多种了，买来的，索莱宝0.2%的，没染出来；自己配的，sigma粉末，0.1%，PH 8.3，用Tris配的，还是没有；1%，直接用蒸馏水溶解的，依旧很淡。
9 z+ b2 g; R/ H/ G3 N2 V" O. z感觉镜下能看到钙结节啊，是不是那种致密透亮的？
1 t- S1 G9 |* ^. y不知道哪里出了问题啊，我还打算染MSC呢，这个染色一直做不出来，真是让我太烦恼了。

细胞海洋

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是你啊

8 J- w8 F) Q1 Z! L" V' |: @+ ^% L, o: |: \+ T$ {+ ~
我也染不出来，求指教。实验太虐心

yinchong42

用的什么牌子的血清？会不会是时间不够，我去年做的时候，做了17天没有结节，做了26天就结节很多了，，，

蛋蛋心月

传个图啊