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[请教] 崩溃,茜素红染色又没有染出来   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2016-11-20 12:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 城墨 于 2016-11-20 12:27 编辑
4 S# q- c/ o! A8 m6 G6 ~( I1 {, Z! e) `( p: v' R
第三次染色了,每次成骨诱导都是大半个月时间
+ ]) S6 A3 {, ]- X, W今天是第三次染色,依旧什么都没有
7 q0 N* A6 c7 C! z% G8 G我的做法是,MC3T3-E1细胞,在VC和甘油磷酸盐的成骨诱导下14天。
+ w  F6 A" F9 U" g7 R! g做AR染色,先PBS洗细胞,再95%乙醇固定10min,再蒸馏水洗三遍,最后茜素红溶液染色。# x7 p" H6 A- l. a
问题是茜素红我已经用过很多种了,买来的,索莱宝0.2%的,没染出来;自己配的,sigma粉末,0.1%,PH 8.3,用Tris配的,还是没有;1%,直接用蒸馏水溶解的,依旧很淡。
9 p6 z- f; o, N4 r感觉镜下能看到钙结节啊,是不是那种致密透亮的?
- B' X4 U# N' Y0 M  f5 q$ C# s不知道哪里出了问题啊,我还打算染MSC呢,这个染色一直做不出来,真是让我太烦恼了。
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沙发
发表于 2016-12-16 15:38 |只看该作者
传个图啊

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金话筒 优秀会员 研讨会精英

藤椅
发表于 2016-12-21 19:33 |只看该作者
用的什么牌子的血清?会不会是时间不够,我去年做的时候,做了17天没有结节,做了26天就结节很多了,,,
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板凳
发表于 2017-1-11 10:09 |只看该作者
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本帖最后由 是你啊 于 2017-1-11 10:10 编辑
7 r+ \  ]' O  h+ R5 W) P/ }( E7 t% o* E- p+ F0 X, I7 @0 S' ~/ C, m0 Z
我也染不出来,求指教。实验太虐心
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报纸
发表于 2017-1-14 22:30 |只看该作者
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* {& X" G2 p8 C  j; T
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