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[讨论] 能够做ChIP的抗体是否一定能做western blot [复制链接]

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楼主
发表于 2016-12-29 19:17 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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以前从Abcam公司买的ChIP-grade的抗体,做Western都没有问题。
# H' B  Z) ]( _6 q7 _% d2 U* c3 U  R最近从santa公司买了一只,抗体,信息如下:
1 @: {- d7 n  W" l; l
1 w, |* {! ?; t* @0 [* v. a- ZTBX3 抗体 (S-17): sc-31657
4 Z& Q" U# M+ J0 N9 w说明书
4 _0 _' t1 o& n8 y' j5 D+ dTBX3 抗体 S-17 是羊多克隆 IgG,提供 200 μg/ml
7 U1 s! @# x, s7 _抗原表位位于mouse物种的TBX3的C-terminus的附近
) p( T. ?% E2 S0 }: r$ d8 d推荐用于 mouse, rat 和 human 来源的TBX3 WB, IP, IF 和 ELISA检测; 也和以下物种反应,包括: 和 equine, canine and porcine
% B2 z6 K) Y/ F, u! @- w$ d可用于凝胶迁移和ChIP的TransCruz试剂(sc-31657 X, 200 μg/0.1 ml)
. s: ^0 Q7 _% }, K5 }" t封闭肽,sc-31657 P
* v. G! O7 H* o+ B; _  f, {9 K" J7 T
9 k6 F- J2 f+ I" |2 q基于以前的经验,我想能做ChIP的,做western应该会更好,所以就买了sc-31657 X,但做了两次都没做出来,9 t/ S& i) ]( c) r, T. [
是santa这种抗体只能做“凝胶迁移和ChIP”?还是western的问题?还是抗体质量的问题呢?
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沙发
发表于 2016-12-29 20:23 |只看该作者
dingaguo!

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藤椅
发表于 2016-12-29 22:08 |只看该作者
抗体的对抗原的识别取决于Fab端的可变区,一般应与免疫时的动物种属无关。建议1、用其他方法如chip验证样本和抗体活性无问题,2验证电转移是否完全;3调整抗体和抗原的比例。祝好运
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板凳
发表于 2016-12-30 08:48 |只看该作者
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( A- l$ `4 {5 _$ `3 g/ c9 |
+ C+ Y, K& U! `2 u, K# K- Vxieapao

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报纸
发表于 2016-12-30 08:48 |只看该作者
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