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[讨论] 能够做ChIP的抗体是否一定能做western blot [复制链接]

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楼主
发表于 2016-12-29 19:17 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
以前从Abcam公司买的ChIP-grade的抗体,做Western都没有问题。
1 N6 w$ e$ Q1 G4 |最近从santa公司买了一只,抗体,信息如下:; [! C+ j- X) {$ P/ d9 Y
7 x0 q4 e7 E8 D- G. ]* \7 b0 V
TBX3 抗体 (S-17): sc-31657
) i! o! ~4 r5 U说明书- B: y$ Y: o% \) X( q: n' K  f. I
TBX3 抗体 S-17 是羊多克隆 IgG,提供 200 μg/ml
$ Q  U1 }- i( _# d- ]抗原表位位于mouse物种的TBX3的C-terminus的附近2 a5 L4 _2 _6 Y
推荐用于 mouse, rat 和 human 来源的TBX3 WB, IP, IF 和 ELISA检测; 也和以下物种反应,包括: 和 equine, canine and porcine
2 q3 x  z$ u4 R2 c) @可用于凝胶迁移和ChIP的TransCruz试剂(sc-31657 X, 200 μg/0.1 ml)4 o  K, E1 D3 ~) Q. Y
封闭肽,sc-31657 P
% C3 O( w3 ^8 `; s
, r# N. Q) H- X, S% {$ V% R基于以前的经验,我想能做ChIP的,做western应该会更好,所以就买了sc-31657 X,但做了两次都没做出来,- c4 C1 J$ F) q
是santa这种抗体只能做“凝胶迁移和ChIP”?还是western的问题?还是抗体质量的问题呢?
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沙发
发表于 2016-12-29 20:23 |只看该作者
dingaguo!

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藤椅
发表于 2016-12-29 22:08 |只看该作者
抗体的对抗原的识别取决于Fab端的可变区,一般应与免疫时的动物种属无关。建议1、用其他方法如chip验证样本和抗体活性无问题,2验证电转移是否完全;3调整抗体和抗原的比例。祝好运
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板凳
发表于 2016-12-30 08:48 |只看该作者
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1 g' s* @- l$ c/ l
xieapao

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报纸
发表于 2016-12-30 08:48 |只看该作者
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# f5 }! h4 [, U+ Z# e+ j  O. z3 W# d0 y
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