P1代BMMSC，这个形态有问题吗？

Leo_yihan

这是我全骨髓贴壁法提取的小鼠BMMSC，已经是P1代了，图片是用相差物镜拍的，可以看到细胞密度大的地方融合很厉害，呈扁平状，普通光镜下看不到，需用相差才能看到。这是细胞老化吗？还是分化了？
! a! E* o% B8 n, Y之前怀疑是支原体污染，已经测过，并没有污染。
1 F, i- n0 F9 J" ?- _* J& h9 [感觉是不是因为自己实验室用的血清不行，我们用的是两千多块的国外血清。血清对MSC的影响大吗？
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cuijiaoyan

回复 Leo_yihan 的帖子8 M+ k8 ]: x3 u4 p' ]. n

, l& W9 _* ?, ^- J( p你传代的细胞密度是多大？这么快老化也太快了些,还有一个原因可能是你的这个样本细胞本身状态不行，你先传代这个样本的细胞，还是继续老化的话换个样本试试。

Leo_yihan

回复 免疫与细胞 的帖子  H5 l; Y7 e) E0 }

, i. a! d3 B# Y' h6 V这是第四天的P1代。请问你的培养基成分是怎样的？我们用的是DMEM/F12+10%FBS+双抗，需要额外添加其他吗？

Leo_yihan

回复 cuijiaoyan 的帖子
  {' Y1 b% f: Q. v
, i( X, m/ O$ }  F/ u* X6 ?. Z5 X2 X用的是10%浓度的胎牛血清。如果添加一些b-FGF老化情况会不会好一些？P0代细胞状态看起来还不错，传过代后就会开始老化。

cuijiaoyan

个别细胞已经变得很宽，说明已经开始老化了，细胞的状态不均一，血清对MSC的生长影响很大，用的胎牛血清吗？不过细胞本身的状态也需要考虑，血清浓度大和细胞接种密度太低均容易使细胞老化，你传一代再看看吧。

免疫与细胞

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7 \1 t2 e+ j/ D回复 Leo_yihan 的帖子. U9 ]; Y( k5 J& y5 M6 |' F
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P1代培养多久了，看着感觉没什么问题，细胞生长就这样，先长的密集，再向外扩散