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请问分离培养小鼠脂肪干细胞用的什么培养基? [复制链接]

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楼主
发表于 2017-5-8 20:07 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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实验室有师姐养的大鼠ADSCs,用的是:DMEM-HG,12.5% FBS,10 ng/mL bFGF,双抗(青霉素100 U/mL,链霉素100 U/mL。分离好几次了,细胞老化非常快,我查阅文献有人用的低糖DMEM,大家有什么好的建议吗?急求。
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沙发
发表于 2017-5-8 20:25 |只看该作者

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藤椅
发表于 2017-5-8 20:25 |只看该作者

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板凳
发表于 2017-5-9 09:19 |只看该作者
回复 城墨 的帖子
! w0 d  b) J% g, K2 N' e
3 @2 S" S  l6 p- v( E这个图也太不清楚了点吧,一般干细胞都不适合用高糖培养基。低糖的M199,DMEM,1640,DMEM/F12都养过,都能长出来。干细胞培养所用完全培养基养分不能太高,高了就容易分化。12%的血清已经很高了。有条件的话可以买干细胞专用的培养基试试,不过太贵,本人没用,不知道到底好用不好用
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报纸
发表于 2017-5-9 15:14 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子
( E( u7 Q6 ?" j. I- O8 ~0 b- O( c5 F" h) D6 M! [4 m0 n5 h+ A
谢谢,查了一些文献用DMEM/F12的占多数,打算换DMEM/F12养,把血清降到10%。以前一个师姐用高糖养的大鼠脂肪干细胞,好像还可以。
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发表于 2017-5-9 17:00 |只看该作者
回复 城墨 的帖子
" w. k3 x$ J2 b2 R# g. m8 `; w- m; a, O. {, ^; O
其实要说的话我感觉M199的效果会更好一点。血清的话甚至5%都够了。
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发表于 2017-5-10 08:50 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子3 W3 a$ d: A; A+ l- T$ H

, T) U6 J" S% i% T0 {6 Y& |谢谢,我还有一个你问,我查了一下Gibco的DMEM/F12,发现它也是含高糖的,会不会也会影响?
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发表于 2017-5-10 09:05 |只看该作者
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* Y, g3 Q5 Y! c/ ~, j& U0 j+ m8 w6 Z) `9 w! z1 I6 r0 h
你买低糖的啊,DMEM/F12不是高糖啊,你看错了吧
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发表于 2017-5-10 10:00 |只看该作者
回复 fenglinzhu 的帖子3 q& k3 Y3 w$ D5 ^. d
0 ^' s4 x' v) q* y
查了一下,Gibco DMEM/F12只有高糖的。好多文献上面只说使用DMEM+10%FBS培养,这里DMEM是默认低糖吗?
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发表于 2017-5-10 11:07 |只看该作者
回复 城墨 的帖子
6 f1 z4 m8 m4 r! U. ~, c# L, r& W- Z
好像DMEM/F12是没有高糖低糖的说法的,含糖量不算高的。DMEM的话最好用低糖吧,高糖可以养,但传几代就分化了。
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