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谈谈我对细胞诱导分化的看法   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2009-7-12 20:45 |只看该作者 |正序浏览 |打印
谈谈我对细胞诱导分化的看法
; g# {3 `9 b$ p" \细胞诱导分化都要经历分离-扩增-诱导分化3个步骤' H/ o1 i. U' N; V& d
其中扩增这一步很关键,理由如下:% ?  }+ w7 c# t6 _
1.具有多向分化能力的细胞在分离得到的细胞中的比例非常小,如果不扩增,即使诱导分化成功也难观测到
% x% j' M& d3 Y; P6 Z7 y2.扩增过程一般不少于己于一个星期,在这段时间必须使具有多向分化能力的细胞处于分化抑制状态,从而保持多向分化能力- j6 }# J2 {  f; c; S
3.由于扩增期间采用无血清培养,一些分化成熟的细胞凋亡,干细胞比例上升,提高了诱导成功率  ^, |8 O" a$ c# ~2 J9 q9 Y
以上几个方面可能有不全面的地方,请各位同志批评指正
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发表于 2010-7-31 19:31 |只看该作者
MSC分化前也得用无血清的培养基么?生长的状态如何?
# A  P, t5 D0 o3 ]( z1 X. s5 V9 P# {* Z4 Q! m
分化前应该不用用无血清培养基吧 无血清培养基中一般加有一些诱导因子 来诱导细胞分化 细胞分化前状态一定在最好的状态效果才好 如果细胞已经老化 增殖速度下降 分化的效果也不好 我们用兔子的BMMSCs做诱导分化 一般5代以内的细胞都可以 最好是传代两三次的细胞效果比较好
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发表于 2010-7-31 16:32 |只看该作者
从现在的技术层面说,ES都可以成功诱导分化成哪些细胞?哪个研究比较成熟?

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发表于 2010-7-29 11:29 |只看该作者
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学习了,thanks!

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发表于 2010-7-29 11:02 |只看该作者
非常赞同“诱导分化的代数问题  其实要视情况而定 ”的观点8 M& z# R, Q/ ?; ?9 H6 ?0 O
对于成体NSCS诱导分化研究的文章所用的细胞,从1代到6代的都有,但绝大部分是2代以后的。而且不同时间段的成体干细胞可传代的次数不一样。还有,可传代的次数跟实验过程中添加的因子的情况、实验操作手法、传代时间的间隔应该都有一定关系,个人认为。
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发表于 2010-7-16 14:05 |只看该作者
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发表于 2010-7-13 14:32 |只看该作者
诱导分化时一定要用无血清吗?我用的5%FBS的LG-DMEM,也可以分化的啊
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发表于 2010-7-10 23:43 |只看该作者
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发表于 2010-6-5 16:35 |只看该作者
谢谢

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发表于 2010-6-2 23:01 |只看该作者
我们做的是小鼠MSC的分化,基本也就只传几代,看到细胞状态较好就可以分化了,效果还不错
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