脐带间充质干细胞酶消化相关问题讨论

小飞雪2300

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请问，分离脐带间充质干细胞，消化华通胶用什么酶消化最好？一般消化多长时间？用胰酶或胶原酶消化后液体很粘稠，如何处理？离心时根本没有细胞被离下来，你们如何离心？请问用酶消化华通胶的大神，你们都是怎么处理的？谢谢

小飞雪2300

回复 伊诺强 的帖子& r8 g  c1 n3 y! m: [9 q$ C
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之前用过II型胶原酶，特别粘稠。离心时10倍稀释都不好离心。你消化液与组织块的体积比一般是多少？

小飞雪2300

回复 淘知路遥 的帖子
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浓度是多少？胶原酶的浓度又是多少？消化多长时间？细胞得率高吗？

小飞雪2300

我用II型胶原酶消化半个小时，离心，收集细胞，显微镜下可以看到细胞，培养5天，细胞都不贴壁，后丢弃没有在继续培养。半小时消化，组织块并没有完成消化，剩余的组织块放培养箱继续培养，第二天发现组织块全消化不见了，目前是5天，也没见有细胞爬出。

小飞雪2300

关于酶消化的问题，我提出自己的看法，很多文献上说用胶原酶消化，有说是II型，有说是IIII，也有说用胶原酶消化能得到高的细胞产率，可多高，又有谁去解释呢？之前有听说从国外的一种混合酶，消化脐带比一般胶原酶长得好很多，Po代就可以收到108级细胞，我在想，国内做这个的有很多人，为什么就不能把经验细节分享出来，我们也不能只止步于用现有的胶原酶消化，在论坛中能看出来，按文献做，很多人都做不出来的。做出来的人讲的又不够详细。希望有经验的人还是多出来帮助解决下论坛提供的问题。-我可不是论坛管理人员，只是想在论坛中学习更多的东西。