关于血液加入到淋巴细胞分离液中的问题

gsg040222

回复 long3390hai 的帖子9 Q& z9 g1 M2 N9 S

) r/ i. c+ g& C谢谢

long3390hai

回复 gsg040222 的帖子* ?) @9 w- c0 p$ B
+ i$ g% F4 ]0 @* @
1、离心血液，去血浆，加等体积盐水稀释。: `4 D( _, Q2 ~" v4 K. {
2、混匀血液样品，在加好淋巴分离液的离心管（淋巴分离液：血液=1:1.5）中，沿管壁加入血液样品，先在管壁涂好一条通路，然后缓慢加入，保证液面不被冲破。& y/ n2 ^% F8 n, ^3 r
3、离心转速慢升慢降。
& u  L6 ~+ W& ], O; _4、离心之后，取其上清，在白膜层上方1cm，和下方1cm，全部取出。加盐水混匀，注意盐水和取出液体的比例大于2:1，这样有利于提取PBMC。

Mrhydra52613

回复 gsg040222 的帖子8 ^1 L% L4 W! x) _4 u
# n$ a4 Y2 F. @  {* N( t; x
效果怎么样？话说你们实验室离心速度一般用多少的，我看论坛里这方面的差别还挺大的

wzs1985

回复 阿秀哥 的帖子
3 d5 g, S# ~* ]/ Q- ?$ B& u
* q  j0 w4 F0 w" o& |对的，  抱歉弄错了。8 I- B8 c* A1 m& {1 O
或者1比1也行。

淘知路遥

先加分离液（与稀释血液1:2），离心管倾斜，血液缓慢从管壁加入，避免将分离液层冲破，加了几毫升血液，然后可以将离心管立起来继续加血液

王宏伟8901

去掉血清后，拿生理盐水稀释，再加分离液。

gsg040222

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# y! g3 t$ o& l* ~. h' U7 b) ?6 R" d8 @* b" R+ m* r
谢谢，我进实验室试试

gsg040222

回复 杏色玻璃 的帖子
8 h, ]* c% R% y' b& X. M/ [
& N5 n" f1 H2 c& Q) R, x谢谢

gsg040222

回复 wzs1985 的帖子
- V+ g1 i$ @" O# m+ x1 W0 T+ r; ?* q8 N4 p1 F% ?7 L' z: B: |* A
谢谢

阿秀哥

wzs1985 发表于 2017-6-15 09:48 % l7 l' E# ]+ f* @
你可以试一试：( ^6 F: L& T0 R6 U0 f
1，先离心血液，去除血清后。在用生理盐水稀释。
$ d6 w6 O; ]' _% t$ r" R9 d2，然后按照离心液2：血液1的比例离心。 ...

5 p) V4 v& V  u  z: \2 I( \" J& Y
分离液与血液的比例是1：2吧