关于血液加入到淋巴细胞分离液中的问题

gubingxia

1盐水充分稀释（比例大于1:1）
9 D8 N& g8 S2 z2重悬混匀（不能有团块）3 B/ h9 W3 g% z& V; D
3血液与分离液比例1:1
4 i* ~( c# \5 C8 {4离心管倾斜45度左右，刚开始必须缓慢加液，先用吸管勾勒出缓冲通道，向上提一下，不能让血液直直的冲下去，冲力过大会冲破分界层，分界层建立后加液速度可逐渐加快，随着液面升高离心管慢慢直立起来，因为分离液有毒，要尽量减少与血液的接触时间，还要防止时间过长红细胞沉降
0 R4 v& `* l5 E$ ^* A2 }5离心升10降19,600G2 r" A( E: N* C1 j/ F, c
6取送离心管的过程要小心翼翼，不能晃动，以免打乱分界层。# g& S; h) h6 u/ y# O/ g
7可以先把上层浅黄色的血清吸走，留约3mm左右，眼睛的视线要与分界层平行或者从下往上看，以便更好的观察分界层，用吸管紧挨液面缓慢转着圈吸白膜层，边吸边轻轻移动，直到肉眼看不到有白膜层，尽量少吸白膜层以下的液体8 D% k5 Z* u5 G
8加盐水洗涤充分，离心洗涤3次，第一次1800r,5min,第二次1600r,5min，第三次1400r,5min
& \3 x2 M$ `) K1 e7 ]# O9培养& L7 u0 g1 c4 |  l/ R
我们就是这么提取的效果不错，希望对你有所帮助。离心力可能会因为离心机的品牌不同，参数也会不一样，这个要根据实际情况来调整。我们用的是四川曙光 的离心机