|
- 积分
- 65
- 威望
- 65
- 包包
- 474
|
细胞计数用细胞计数板呀！方法如下：7 l' u! Z6 ?2 f. U6 r
细胞计数板，通常是一块特制的载玻片，其上由四条槽构成三个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每一边的平台上各刻有一个方格网，每个方格网共分九个大方格，中间的大方格即为计数室，微生物的计数就在计数室中进行。
3 H2 L0 j6 S6 n7 ?
! l- p0 e. t9 z* S8 Q1 H# z计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。所以无论是哪种规格的计数板，每一个大方格中的小方格数都是相同的。 8 m5 E) Q' b0 [# w
8 R1 s3 ~7 G1 D
每一个大方格边长为1㎜，则每一大方格的面积为1㎜2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0.1㎜，所以计数室的容积为0.1㎜3。其计算方法如下：
+ _: A7 F" ~! V; u' E2 w
$ K) U4 y K3 X/ X1 S! g; d6 x1．16×25的计数板计算公式
8 Z. B2 ~& O/ c) u7 Y- B
5 A) a: v1 r) V4 |7 Z: c* P细胞数 ml=(100小格内的细胞数 100)×400×1000×稀释倍数 ) b, V/ D$ z1 B1 ?1 m" x: F
3 t7 P& t) ?# a, F
2．25×16的计数板计算公式
2 c# S( v) i2 a8 b; W0 h, x. I
4 W7 A1 v- X' M J0 I* i( B细胞数 ml=(80小格内的细胞数 80)×400×1000×稀释倍数
" f6 ]+ }% `& j8 W# X- f6 d; r4 y8 d5 N
实验原理：当待测细胞悬液中细胞均匀分布时，通过测定一定体积悬液中的细胞的数目，即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。: ?9 y$ u. K# D; I$ i4 {$ _
具体操作：
% T" q, H6 V% |: N- O$ s2 g7 S: b1. 将计数板及盖片擦拭干净，并将盖片盖在计数板。: k3 f, w0 y8 S. F* k! @; p" i
2. 将细胞悬液吸出少许，滴加在盖片边缘，使悬液充满盖片和计数板之间，静置3min，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
! @7 ~. r& a) \4 f$ H3. 计算板四大格细胞总数，压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算：. F/ c! c, R s' E W; |
细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104/ X& t$ e8 G2 C
说明：公式中除以4，因为计数了4个大格的细胞数。
# ?. F3 M% P$ G- x公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：9 i( ^& j) U4 U6 b1 G3 y+ r. a
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
1 G- P- d' ~; o（注意：镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团，应按单个细胞计算，若细胞团10%以上，说明分散不好，需重新制备细胞悬液） |
-
总评分: 威望 + 5
包包 + 10
查看全部评分
|
发表于 2009-9-14 22:12
