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请教大鼠脂肪干细胞的分离 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2009-9-28 17:04 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我最近准备做大鼠脂肪干细胞的分离,想请教用胰酶消化脂肪能否分离出脂肪干细胞了,分离效率如何了?文献用的多是胶原酶,但是胶原酶有点贵。希望有经验者指点一二,不甚感激!
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沙发
发表于 2009-9-28 20:21 |只看该作者
胰酶没用过,我用过胶原酶消化猪的脂肪分离脂肪干细胞,效果还不错
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藤椅
发表于 2009-9-29 12:26 |只看该作者
谢谢!你用的胶原酶的浓度时多少了?

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板凳
发表于 2009-10-22 14:13 |只看该作者
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胶原酶1   0.2%
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报纸
发表于 2010-3-27 01:05 |只看该作者
请问消化时间?谢谢

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地板
发表于 2010-4-12 22:24 |只看该作者
请问上面同学,我也用胶原酶消化0,1%,60min,但是消化出来的细胞不贴壁,请问怎么办,谢谢

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发表于 2010-5-28 22:26 |只看该作者
接种密度大点,24小时内绝对静止,初次换液可延长到72小时,用进口一次性培养瓶。
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发表于 2010-5-29 07:44 |只看该作者
一般用0.075%或0.1%的I型胶原酶都可以,消化40至60分钟,有时候胶原酶配好放的太久,酶活性会明显降低。如果贴壁不好,可以用明胶被覆一下可能会增加一部分细胞贴壁。
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