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查看: 92208\|回复: 13	go 单核细胞离心后上清混浊该如何解决？ [复制链接]

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楼主

发表于 2017-8-25 08:14 |只看该作者 |正序浏览 |打印

自己在培养后离心单核细胞时发现在离心管中的上清中总是能够看到很多悬浮的无法离下来的小细胞，严重时细胞呈絮状漂浮。离心前后细胞计数损失很大。自己用400g，5min,9升9降。感觉不是单纯提高离心力就可以解决。不知道是不是因为单核细胞粘性高造成的？不知道有没有遇到类似情况的战友，怎么解决这样的问题？

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14楼

发表于 2018-1-9 14:32 |只看该作者

提高离心力可以使上清中的细胞沉降下去，但此时沉降下去的细胞中很多的细胞状态都不好，可能为死细胞，仪器和计数板计数活率很低，继续培养会漂浮着，养到后期的话，混合培养3-5天后整体活率一般，在72%左右，如果刚开始离心后细胞数量够就直接把上清（含絮状细胞）去掉就行了，不够的话也可以考虑加大离心力，离心后一块养着。

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13楼

发表于 2017-9-12 16:35 |只看该作者

感谢大家的意见，总结一下可能是降速太快了，回来试试7降。活率应该没什么问题。

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12楼

发表于 2017-9-12 11:17 |只看该作者

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洗涤细胞我们一般用升3降5

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11楼

发表于 2017-9-12 11:16 |只看该作者

洗涤细胞我们一般用升3降5

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10楼

发表于 2017-9-12 11:16 |只看该作者

洗涤细胞我们一般用升3降5

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9楼

发表于 2017-8-31 16:21 |只看该作者

转速降低一点。时间增加几分钟。生理盐水多洗几次应该就干净了

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8楼

发表于 2017-8-29 15:43 |只看该作者

之前也遇到类似的问题，你的降速9太高了，降到5或者6吧，离心5-6min就足够了，分层很清楚

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随时准备下线

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7楼

发表于 2017-8-28 10:55 |只看该作者

絮状都是死细胞，降速调到6-7，浑浊的话，你确定是细胞造成的？我想问有没可能是其他成分造成的浑浊？比如血小板

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地板

发表于 2017-8-25 13:25 |只看该作者

9刹车太快，降到7就没问题了

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