关于人IPS/胚胎干细胞培养的几个问题。

gemstone

关于试剂的问题，你可以用人的ES细胞培养一下看看，如果ES细胞都培养不下去，iPS怎么能成功呢？ 关于饲养层的问题，我觉得饲养层细胞密度过大或者太稀都会引起ES或者iPS的分化。最好的办法是处理一批MEF然后冻起来，用一管测试一下浓度，计算好每管能cover的面积。以后就比较一直了。& S& c; H/ `/ b4 }# r, g! I
挑克隆的时候，最好不要时间太长，培养液可以在挑克隆前几小时换好，单个克隆在96孔板扩增。原代克隆其实不用急着机械打成小块，整个克隆转移到一个96孔中让过渡一下，下次传代就可以用IV胶原酶了。