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问一个关于ES胚胎干细胞中基因功能研究的试验设计问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2009-10-24 08:13 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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; I( g3 z# g( I" Q4 c
2 r9 R4 W- g0 ]: `偶然机会发现一个激酶在ES中表达,想进一步做下功能。maybe它对ES selfrenewal and differentiation的影响。现在直接说做overexpression 或knockdown 似乎还为时过早, 请教怎么可以初步检验一下ES中的功能。想做个EB分化看下分化后是不是表达,但是EB理论上含有所有细胞类型,似乎肯定会有的阴有阳。希望大家献计献策。谢谢、、、、、、、、. o! T# n" D! |0 D! _8 Z$ O9 M* x
plus,已知这个基因的敲除小鼠能发育到出生,是不是可以推测其实它对早期发育,多能性影响不大?
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藤椅
发表于 2010-2-2 22:00 |只看该作者
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沙发
发表于 2010-2-1 16:06 |只看该作者
激酶一般 是磷酸化 ,既然 怀疑 是  保持增殖的能力 。
$ `* y$ A2 c7 V( x
+ `. }8 X' {3 T- l, ~8 c+ `' u让细胞 分化了 ,可能 酶活就没有了 。  做WESTERN   , 全部的和 磷酸化的都做。; M4 v/ |# {: W5 ]7 q
  Z% i3 x" X0 j% Y+ m7 D8 C, H
看到变化了 ,可能你的 设想就是对的
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