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回复 1# xialiguang ( c* s) x1 z3 z9 n
谢谢你的问题,这方面的实验做的不多,不过可以提一些意见供你参考。
1 Z, J+ f J% O, w' Y1.首先你做的是FASC检测,而不是FASC分选,所以流式参数要求不是非常严格,可以参照人血液标本,或稍加改变。/ d u9 K1 r9 [5 u- V6 e
2.SD大鼠的神经干细胞是否比常规一般的人血液中的淋巴细胞要小?这个不是很清楚,只知道干细胞一般核质比都比一般的细胞要大。但我想神经干细胞与淋巴细胞不会有几十倍的大小差异,所以对流式影响应该不会很大。
! x( x' L/ p. y- @2 i3.关于细胞碎片的问题,看你的神经干细胞是贴壁培养还是以神经球的方式悬浮培养,在消化时控制一下胰酶的浓度和消化时间,离心的时候条件也不要太剧烈,以免压碎细胞,其实这些也是一般细胞制作单细胞悬液时应该注意的,这方面的技术问题,你可以参考一些FACS的操作规程注意事项。
. \4 Z6 j3 F( a4 B7 r! b说了这么多,好像也没帮上什么忙,关键你可以做一下预实验,FACS的技术参数的问题你可以问常做FACS的操作人员。 |
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