请教iPS克隆形成过程中的技术问题

shirlylyh

请教，有经验的同学，在等待人iPS克隆形成的20多天里，MEF需不需要要再补充，或等MEF不行了，用条件培养基？或者不管它，只是每天换ES培养液？ 多谢。

jayhaoli01

回复 1# shirlylyh
/ D+ t( `: X) B; o) }' k
+ U4 g0 R5 Z, M! C. \' Z" q3 F9 g: v
    小鼠的不用！人的需要更换MEF！一般只能使用两周！

shirlylyh

回复 2# jayhaoli01 , \; _% V6 U$ L% k) G* X$ i* M  _
4 @4 d5 p; z2 l/ u
谢谢。您的意思是补充进去MEF，而不是把细胞消化下来，重新铺于MEF上吧。如果补充进去，那会影响细胞密度，是不是也影响克隆生成呢？多谢。

jayhaoli01

回复 3# shirlylyh
0 @6 A1 U$ E3 `# E8 l3 j6 u. I. ~
8 G3 ?/ k/ e  s3 A# _& V# Z8 s  w5 G) H
    更换！没办法补充！补充不就盖上了吗？还有就像你说的会影响细胞密度、影响克隆的生成！我也只是知道一点！有好的经验大家交流！~:)

Jonathan

回复 4# jayhaoli01
' m8 ~8 T! |/ P* Y# e! Q我们一般不补充，一般到十几天后feeder会变的稀，那么就换condition medium

missyoudad

还是不大明白啊

ruochenzu

谢谢

ruanyao57

两周后，用条件培养基培养就可以了。

daviehe

对啊，用MEF-conditoned  medium作为代替啊