请教-大家都怎么计数sphere的？

dwc326

我们也养出了sphere/shperoid,也想给球计数，但是一直没能成功。- d4 P( \3 o* T: A
曾经用显微镜照相，再测量最大直径，但都无法计算一个球里到底有多少个细胞。9 F9 Z# D. f( z* @7 k: ], M
觉得此路不通啊

火云豹

你用VI-CELL活性细胞计数仪试试看 不但可以测出细胞的总数 还有存活率 细胞直径都可以测出来

qyguoguo

万分期待高人的回复

mhm

应该可以用96孔板单克隆实验，看形成细胞集落的百分比。

djj01

通过计数板至于几孔的可能分不同情况吧，来源，大小，等，如来自大脑的神经球有它固定的孔等，值得探讨。。。

lsp_318

好像还是没有一个标准啊，到底该怎么计数呢，老是看别人说每个孔多少多少细胞，不知道怎么算出来的

sean-shawn

我们老板让我们直接在显微镜下数 多少个克隆球 用96孔板做的 种一百个细胞或者一千个细胞 2周算一代

深海寂寞鱼

回复 饶冠华 的帖子  x( p4 J( Q; Y( z/ j9 K

. @5 V1 g  _+ R具体方法是这样的：
' [6 X9 A0 P( E; K$ i
" I) K" f4 S  l) @/ C# l, j取适当数目的细胞（100或1000个）接种在96孔板或者24孔板，培养适当的时间（通常14天）。然后直接在倒置显微镜下计数。0 _/ D) t! q8 g4 x, C
5 E; ?6 G. {5 l( Y" f( f7 n8 N
注：
9 n! t+ P: F& y1. 接种的细胞数目，最好能做个预实验，估算一下。如果成球的百分比高，就按每孔100个或者200个细胞接种。如果成球的百分比很低，则可以考虑每孔1000个细胞接种。5 V4 c' A7 t8 Q9 H# M

; G' u2 O0 c8 u2. 也曾看到有网友分享经验：为了尽可能减少成球时细胞聚集物的产生，可以将细胞接种在6孔板。但是6孔板在显微镜下计数相对比较困难，容易漏记或者重复计数。当时那个网友推荐了一个解决方法，用一张透明纸或者塑料纸，提前在上面画上细细的横线和竖线，然后将这张纸垫在6孔板下面再计数。这个方法我没有具体试过。但是理论上觉得由于聚焦的问题，当把显微镜调整到看以看清肿瘤球的焦平面时，还能看到纸上的横线和竖线吗？
! Z7 w0 f; s! }8 k$ m5 @! b- U$ q7 U8 H; S0 d

深海寂寞鱼

啊？$ J4 K$ P/ _- k; E9 w% Z1 M
突然发现，这个帖子是一年以前的。
% |# ^% L& _9 S% i& s; V. {4 w+ g1 c" e$ A: Q2 n  [5 t) [
为什么这个帖子会出现在这么靠前的位置？奇怪啊。

细胞海洋

回复 深海寂寞鱼 的帖子5 w" _( l4 u. g, H& _, R

0 x' z* a- h! L' t有人回复 就会靠前