MSC传代后生长情况不好，传代注意问题？

hawkyiger

养的脐带MSC，原代细胞生长良好，但传代后生长速度较慢且状态不好，问一下传代过程中应注意的问题。细胞密度可以但增值缓慢。

yuheng

首先是血清的选择，选择质量较好的胎牛血清。然后细胞密度不要太低否则影响生长，另外可以考虑加些生长因子。
( N" r4 m8 n6 f1 \1 P; V你说的细胞密度可以增殖缓慢是什么意思？计数法测得细胞数么？

cl5823283

胰酶消化后要离心洗掉，不然对细胞大

kqyy

可能是传代的问题

mahong_ok

首先是消化的酶浓度不能太高，时间不能太长，到时间消化不下来就算了，只要消化下来的就可以了。
. s+ `) h0 f; {) x( D1 ~换液要半量换，不能全换。血清浓度不要超过15%，5-8%就可以。
& C4 g$ X! c% _4 u4 e总之要比养一般的细胞要注意点儿，用的试剂也不能太对付，如果不是资金太紧张，尽可能用好的，少重复几次钱就省出来了。

mason658616

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2 U) }, @% G0 H  @4 K, W' h问一下半量换液和低血清培养的好处？有什么依据吗？多谢！

sherolily

我做过全量换液的细胞生长曲线，出现部分锯齿形，换液后的第二天再测 ，细胞浓度肯定要比前一天的低，可能跟细胞换液后的生长环境有关，决定以后半量换液，我们学校其他的验室的同学都是这么做的。

viv2005

我的感觉是传代不能太稀，1:2传，长的很快，1:3传感觉细胞就不长了。我的感觉跟ls的有些不一样，我觉得细胞培养基不变色，但是仍然需要换，我用的alpha—MEM

1301918986

我养的脐带MSC以1：2传代，生长速率还可以啊。只是细胞形态不好，不知到是不是培养基的问题。

1301918986

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$ T  v) ^- l1 s5 R- x问一下，你用的什么培养基？我们用的是DF12