细胞状态一直不好，大家看下细胞表面和细胞之间的小黑点儿是不是支原体污染

ambassador

在细胞培养的时候，有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动（类似布朗运动），这种小黑点既不是细菌、霉菌，也不是支原体（我们曾经请周守长用血平板培养过，没有菌落出现），目前业内人士称其为“黑胶虫”。
; r2 P9 n( q8 H* C    个人觉得是血清的问题，处理方法可以参照如下：& t6 `* ~" R2 m! u4 O) c
( A4 @( r7 ^. f7 ]$ b8 \" ]; U
    首先，血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到56度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。
" [9 B; n. E! D) G/ `" N$ \　　第二，血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。
4 T6 a& d) ?- V& `( P4 e% `　　第三，细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。