脂肪干细胞的有关问题

xiaogongji

本人在用SD大鼠脂肪提取脂肪干细胞，按文献报道用0.1%Ⅰ胶原酶，消化60min，可弄下来的细胞不贴壁，现在换成一次性的瓶子，还是不贴壁，求助好心人，谢了。
$ X1 z3 M2 w$ c+ }2 @                                西安交大医学院
9 v3 E( m$ X! \# s+ o2 d/ S                                              姬文晨     
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bing119

不太清楚 我做的是人的 0.075%1型胶原酶 30分钟

decloud2009

不同的培养皿有区别去的啊，有些是专门经过coat处理的。  l: V1 p( Z; ~* h5 p: \

9 a4 j- ?% {. C0 i) i我们也消这么久，米事啊。。

jqm12345

你用的是什么培养基

xiaogongji

回复 4# jqm12345
4 ?/ o2 n9 H# u2 }0 U! c
3 [7 u/ _: \5 j& i- T* t; y6 o$ h3 Y5 P0 V4 j  h
    高糖DMEM/FBS10%

liqiulinglql

用DMEM-F12吧

susannajoke

回复 1# xiaogongji
* `/ @1 e7 C; p. G6 m$ i' k* I
2 ^: q, s2 _6 o* C. _3 s9 q& e6 P' U7 ~( B6 v/ c
    我换成DMEM，我看有些文献上是低糖的，现在贴壁了，你试试

susannajoke

我的消化了一个小时，浓度1.5%胶原一型，没有问题，细胞现在用了DMEM、10%FBS可以贴壁，但是传代有时候不贴，建议你多试几种培养基

lymphj198511

DMEM-F12，我就用的这个，然后就是你的消化时间改成四十分钟试试，我一般都用四十分钟，贴壁都很好。消化时间太长夜有害于细胞！

S20091415

我也培养的大鼠脂肪干细胞，培养48h后，发现还是不贴壁，是什么原因呢，请问，你们用的是什么培养瓶呢？