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[请教] 关于双抗问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-4-19 09:19 |只看该作者 |正序浏览 |打印
不知道干细胞培养原液(没加血清之类前)加双抗后能4度保存多长时间?我国外访问时发现他们是500ml新培养液里直接按比例加双抗的,但我怀疑长时间用不完是不是失效了??希望各位给个指点!谢谢了!
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发表于 2010-4-25 21:31 |只看该作者
其实原理上是可以的,因为在不高于20度的情况下,双抗是可以保存有一定时间的。但是我看国内实验室大部分是在新鲜的培养液中临时加入适量的双抗的,甚至有的实验室连双抗都是临时配置的,我倒是认为临时配可以保持其抗性,但是国外方法倒是降低了了引入污染微生物的危险
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发表于 2010-4-20 09:13 |只看该作者
一般也不加
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发表于 2010-4-19 23:28 |只看该作者
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我一般是在配完全培养基时就按比例加入双抗,加入双抗是为了防止污染,但是你比较自信自己的操作可以不加,据我所知从中科院细胞库培养细胞时,在培养液中是不加双抗的。我曾经试过一瓶配置好的(已加双抗)培养基放了两个月,还能照样培养细胞,并且没有出现过污染的情况!

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发表于 2010-4-19 23:28 |只看该作者
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发表于 2010-4-19 23:28 |只看该作者
我一般是在配完全培养基时就按比例加入双抗,加入双抗是为了防止污染,但是你比较自信自己的操作可以不加,据我所知从中科院细胞库培养细胞时,在培养液中是不加双抗的。我曾经试过一瓶配置好的(已加双抗)培养基放了两个月,还能照样培养细胞,并且没有出现过污染的情况!
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-4-19 16:50 |只看该作者
双抗的加入主要是害怕污染,其实好多实验室都是不加双抗的,至于双抗的效力问题我们是50ml/500ul,两三天基本用完
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地板
发表于 2010-4-19 11:42 |只看该作者
我们把双抗配成1000*的母液,分装成1ML 1管,存放在-20度,配培养液的时候取1支加到1L培养液中,过滤。。
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报纸
发表于 2010-4-19 10:37 |只看该作者
一定要加双抗吗?我除了取原代的时候用的液体加双抗,传代培养用的培养液都没有加双抗。
4 ^1 q3 t/ D# z& \0 ^; y9 n) Q原代的培养液我一次就配50ml,加了双抗加了血清后,50ml用得比较快。一个月内肯定可以用完的。
+ d$ I8 g  x2 q长期保存的倒是没有试过。9 R  b* `3 O& r  t+ C% m
其实我觉得操作注意,应该没有那么容易污染,双抗加不加不是必然。
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板凳
发表于 2010-4-19 09:40 |只看该作者
我们都是配培养液(加血清等)的时候加双抗的,配一次是500-1000ml.我们的培养液用得很快,一两周肯定是可以用完的。
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